北方偉業(yè)計量集團有限公司
二、結(jié)果與討論
1、單因素實驗
(1)(NH4)2SO4添加量對瑪咖多糖提取率的影響
由圖1可知,開始隨著(NH4)2SO4添加量從10%增加到30%時,瑪咖多糖的提取率在增加,由35.5%增加至40.9%,這可能是NH4+和SO4+可以穩(wěn)定大分子間的相互作用,使萃取體系更加穩(wěn)定,多糖能更好地溶解在溶劑中;當(NH4)2SO4添加量增加到40%及以后,瑪咖多糖的提取率呈減少趨勢,這是由于鹽濃度過高會使多糖和水分子之間的氫鍵作用力被減弱,從而降低了多糖的提取率,因此初步選擇液料比為10%~30%之間。
(2)叔丁醇添加量對瑪咖多糖提取率的影響
由圖2可知,隨著叔丁醇添加量的增加,瑪咖多糖的提取率也相應增加,在叔丁醇添加量在5mL~10mL之間,瑪咖多糖提取率增加幅度較大,這可能是由于增加叔丁醇的含量和(NH4)2SO4的含量引起相互作用的結(jié)果,導致多糖提取率的增加;但是當叔丁醇添加量超過15mL后,瑪咖多糖的提取率大幅下降,這可能是叔丁醇的含量過高不利于三相體系的穩(wěn)定性,所以初步選擇瑪咖多糖的叔丁醇添加量在5~15mL之間。
(3)萃取溫度對瑪咖多糖提取率的影響
由圖3可知,當瑪咖多糖萃取溫度在20℃~40℃之間逐漸增加時,瑪咖多糖的提取率34.3%增加至41.5%,這可能是因為溫度的增加讓三相萃取溶液體系中分子熱運動加快,這樣瑪咖多糖更容易從瑪咖粉中進入到萃取溶液中,從而瑪咖多糖的提取率增加;當萃取溫度超過40℃以后,瑪咖多糖的提取率出現(xiàn)下降,這可能溫度增加超過一定范圍后,雖然多糖分子的熱運動速度增加了,但是與其他物質(zhì)間的反應以及反應速率也在增加,提取出的瑪咖多糖顏色也在加深,說明高溫對瑪咖多糖的活性也有影響,所以選擇提取溫度20℃~40℃進行響應面優(yōu)化實驗。
(4)水提次數(shù)對瑪咖多糖提取率的影響
由圖4可知,蒸餾水提次數(shù)對瑪咖多糖的提取率影響不大,在提取1~4次范圍內(nèi),多糖提取率都在42%左右波動。提取1次時,多糖提取率最低,為41.6%;提取4次時,多糖提取率最高,為42.1%,兩種之間相差不大。從節(jié)約和經(jīng)濟的角度考慮,將提取次數(shù)定為1次,考慮到提取次數(shù)對瑪咖多糖提取影響不明顯,故而在響應面試驗中提取次數(shù)不作為考察因子進行考慮。
2、響應面優(yōu)化實驗
由Design-Expert軟件處理數(shù)據(jù),方差分析結(jié)果見表2。對響應值與各個因素進行回歸擬合,該模型對應的回歸方程:
多糖提取率=43.4+1.6A+1.8B+1.2C-0.83AB-1.48AC0.33BC-2.14A2-7.79B2-4.24C2
由表3結(jié)果可知,整體模型P值<0.01,說明此時回歸方差模型極顯著,該試驗方法可靠。方程失擬項也極顯著,該回歸模型與實測值能較好的擬合。其中A-(NH4)2SO4添加量,B-叔丁醇添加量對響應值影響顯著(P<0.05),B2、C2對響應值影響極顯著(P<0.01),各個因素對瑪咖多糖得率影響大小順序依次為:叔丁醇添加量(B)>(NH4)2SO4添加量(A)>萃取溫度(C)。
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