肉蓯蓉為列當(dāng)科植物肉蓯蓉CistanchedeserticolaY.C.Ma或管花肉蓯蓉Cistanchetubulosa（Schenk）R.Wight干燥的帶鱗葉的肉質(zhì)莖，其具有補(bǔ)腎陽，益精血，潤(rùn)腸通便的作用，常用于腎陽不足，精血虧虛，陽痿不孕，腰膝酸軟，筋骨無力，腸燥便秘等癥狀。隨著中國(guó)人口的老齡化及現(xiàn)代生活壓力的不斷增加，便秘的患病率有逐漸升高之勢(shì)。肉蓯蓉作為中國(guó)傳統(tǒng)的潤(rùn)腸通便類中藥越來越受到重視，有研究表明，肉蓯蓉通便作用的藥效物質(zhì)是總寡糖（包括寡糖和半乳糖醇）。肉蓯蓉經(jīng)過水提、濃縮、醇沉之后，濃縮上清液經(jīng)大孔樹脂純化，其水洗脫液部分經(jīng)過減壓濃縮至稠膏，即得肉蓯蓉總寡糖。由于肉蓯蓉一般生長(zhǎng)在鹽漬化的松軟沙地上，導(dǎo)致其藥材本身的鹽分含量高，而通過上述工藝制備得到的肉蓯蓉總寡糖含有大量的金屬鹽離子及色素。若想從肉蓯蓉寡糖部位中提純?nèi)馍惾毓烟?，開發(fā)治療便秘的相關(guān)藥物及保健食品，則必須對(duì)肉蓯蓉寡糖部位進(jìn)行脫鹽脫色處理。由于肉蓯蓉寡糖和半乳糖醇分子量十分小，水溶性極強(qiáng)，難以應(yīng)用凝膠樹脂進(jìn)行脫鹽處理。而大孔樹脂具有強(qiáng)吸附能力、易洗脫、機(jī)械強(qiáng)度高等優(yōu)點(diǎn)，利用大孔離子交換樹脂可以和溶液中陰陽離子交換，脫除溶液中的鹽類，而大孔樹脂的強(qiáng)吸附能力可以用于色素脫除。

本文從肉蓯蓉總寡糖部位中提純?nèi)馍惾乜偣烟?，采用陰陽離子交換樹脂串聯(lián)法對(duì)肉蓯蓉總寡糖部位進(jìn)行了脫鹽脫色，根據(jù)不同離子交換樹脂對(duì)提取液脫色脫鹽的靜態(tài)吸附，確定脫色脫鹽最佳樹脂組，然后對(duì)最佳陰陽離子交換樹脂組合進(jìn)行脫色脫鹽工藝優(yōu)化，確定最佳工藝條件，為肉蓯蓉寡糖脫色脫鹽工藝提供一定的理論基礎(chǔ)。

一、材料與儀器

肉蓯蓉飲片購(gòu)自安徽新盛中藥飲片有限公司，經(jīng)趙奎君教授鑒定為荒漠肉蓯蓉CistanchedeserticolaY.C.Ma的干燥帶鱗葉的肉質(zhì)莖；AB-8大孔樹脂、LS-840樹脂、LS--850樹脂，西安藍(lán)深樹脂有限公司；半乳糖醇對(duì)照品由北京大學(xué)中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究中心提供，經(jīng)HPLC-ELSD檢測(cè)確定純度大于98%。

UV-2001紫外可見分光光度計(jì)（日本島津）；FE20pH計(jì)（Mettler—Toledo）；DDS-307型電導(dǎo)率儀（上海光學(xué)儀器廠）；DDB-320多功能蠕動(dòng)泵（上海之信儀器有限公司）；Waters600高效液相色譜儀；N-1001旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（EYELA）。

二、方法

1、肉蓯蓉總寡糖的制備

取肉蓯蓉藥材2kg，加8倍量水加熱回流提取2次，每次2h，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度達(dá)1.13（60⁰C測(cè)定），加95%乙醇至含醇量達(dá)60%，靜置過夜，濾過，濾液減壓濃縮至1.15（50C測(cè)定），在經(jīng)AB-8大孔樹脂純化，用水洗脫，收集水洗脫液，減壓濃縮至稠膏即得肉蓯蓉總寡糖部位。

2、陰陽離子交換樹脂的篩選

（1）樹脂的處理

LS-840樹脂處理：樹脂用水浸洗，濕法裝柱（2.6cmx30cm），先用3BV的去離子水以1BV/h的流速?zèng)_洗樹脂層，再用3BV的4%鹽酸處理，以相同流速?zèng)_洗樹脂層，結(jié)束后用純水清洗樹脂至pH至中性，待用。

LS-850樹脂處理：樹脂用水浸洗，然后濕法裝柱（2.6cmx30cm），先用3BV的去離子水以1BV/h的流速清洗樹脂，再用3BV的4%氫氧化鈉溶液，以相同流速?zèng)_洗樹脂層，結(jié)束后用純水清洗樹脂至pH至中性，待用。

（2）樹脂對(duì)肉蓯蓉總寡糖脫鹽、脫色動(dòng)態(tài)吸附試驗(yàn)

將LS-840酸性陽離子交換樹脂和LS-850堿性陰離子交換樹脂按照體積比2∶1、1.5∶1、1.2∶1、1∶1、0.8∶1的順序裝柱，按照LS-840樹脂LS-850樹脂的順序串聯(lián)。取100mL肉蓯蓉寡糖部位液體上柱，控制流速在2BV/h，等流出液糖度大于0之后，收集洗脫液，計(jì)算脫鹽率和脫色。

（3）流速對(duì)脫鹽脫色的影響

將LS-840酸性陽離子樹脂和LS--850堿性陰離子交換樹脂按照體積比1.2∶1串聯(lián)裝柱，取300mL體積分?jǐn)?shù)10%的肉蓯蓉總寡糖部位上柱，控制不同流速1BV/h、2BV/h、4BV/h，等流出液糖度大于0之后，每隔30min收集1管，測(cè)定每管的電導(dǎo)率及吸光度。

（4）料液濃度對(duì)脫鹽脫色的影響

將LS--840酸性陽離子交換樹脂與LS-850堿性陰離子樹脂交換按照體積比1.2∶1串聯(lián)裝柱，分別取料液濃度5%、10%、15%、20%、25%的肉蓯蓉總寡糖部位100mL上柱，控制流速在2BV/h，等流出液糖度大于0之后，收集洗脫液，測(cè)定洗脫液的電導(dǎo)率和吸光度。

3、樹脂的再生

LS--840大孔樹脂選擇1mo/L的鹽酸溶液50mL作為解吸劑，LS--850大孔樹脂選擇lmol/L的氫氧化鈉作為解吸劑。LS-840酸性陽離子交換樹脂與LS-850堿性陰離子交換樹脂柱體積比為1.2∶1，流速為2BV/h，肉蓯蓉總寡糖部位的濃度為10%。在此條件下，處理4BV的肉蓯蓉總寡糖，比較不同使用次數(shù)下的糖液脫鹽率及脫色率的變化，觀察樹脂連續(xù)使用9次的動(dòng)態(tài)再生情況。

4、測(cè)定方法

（1）總糖的測(cè)定

利用硫酸一苯酚法，以葡萄糖為對(duì)照對(duì)肉蓯蓉總寡糖部位進(jìn)行總糖測(cè)定，采用HPLC-ELSD方法對(duì)該部位的半乳糖醇進(jìn)行了含量測(cè)定。HPLC-ELSD色譜條件：色譜柱，AlltechPevailCarbohydrateES（4.6mmx250mm，5μm）；流動(dòng)相，乙腈-水（體積比為80∶20）；保留時(shí)間，30min；ELSD檢測(cè)器漂流管溫度為800C，載氣流速為3.0L/min。

（2）灰分的測(cè)定

灰分含量測(cè)定采用GB5009.4-2001方法。

（3）脫鹽率的測(cè)定

式中：Ko為肉蓯蓉總寡糖部位經(jīng)樹脂處理前的電導(dǎo)率，mS/cm；

K1為每管流出液的電導(dǎo)率，mS/cm。

（4）脫色率的測(cè)定；

式中：Ao為肉蓯蓉總寡糖部位經(jīng)樹脂處理前的吸光度，A為每管流出液的吸光度。

三、結(jié)果與討論

1、肉蓯蓉總寡糖部位的成分

分析由表1可知，肉蓯蓉總寡糖部位含總糖69.42%，其中半乳糖醇含量為肉蓯蓉總寡糖部位的27.75%，總糖中含將近一半的半乳糖醇。由表1可知，肉蓯蓉總寡糖部位中含有大量的鹽分，導(dǎo)致灰分占肉蓯蓉總寡糖部位有20%左右，嚴(yán)重影響了肉蓯蓉總寡糖的進(jìn)上步開發(fā)利用。

2、陰陽離子交換樹脂的篩選

（1）陰陽離子樹脂柱體積比對(duì)脫鹽脫色的影響

由圖1可知陰陽離子樹脂比在1.2∶1時(shí)脫鹽效果最好，同時(shí)也說明了肉蓯蓉總寡糖部位中鹽類主要以弱堿性陰離子形式存在。樹脂比例對(duì)脫色效果影響較小，陰陽樹脂比在2∶1至1∶1時(shí)，脫色率變化范圍很小，當(dāng)樹脂比小于1：1時(shí)，脫色效果明顯減弱。綜合考慮，為了獲得一個(gè)較好的脫色脫鹽效果，選用最佳柱體積比為1.2∶1。

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