2 結果與分析

2.1 LPX3和LPG2的純化

從新鮮和十制龍眼果肉中分離純化得到LPX3和LPG2兩種多糖。LPX3和LPG2的串聯(lián)凝膠柱色譜圖如圖1所示。結果顯示，LPX3和LPG2均呈現(xiàn)單一對稱的色譜峰且相對分子質量分布較窄，出峰時間分別為19.45min和26.50min，表明LPX3和LPG2具有較好的均一性。

2.2 LPX3和LPG2對腸系膜淋巴結細胞增殖的影響

南圖2可知，與空白對照組相比，隨著LPX3和LPG2質量濃度的增加(6.25～200μg/mL)，腸系膜淋巴結細胞的增殖分數(shù)顯著增加(P＜0.05)。當LPX3和LPG2質量濃度為200μg/mL時，腸系膜淋巴結細胞的增殖分數(shù)分別為235.45％和227.60％，兩者問無顯著差異(P＞0.05)。表明LPX3和LPG2均對小力更強。鼠腸系膜淋巴結細胞無毒性作用，且能促進其增殖。

2.3 LPX3和LPG2對巨噬細胞增殖的影響

由圖3可知，與空白對照組相比，隨著LPXLPG2質量濃度的增加(100～400μg/mL)，巨噬細胞的增殖分數(shù)顯著增加(P＜0.05)。當質量濃度為100μg/mL和200μg/mL時，LPX3和LPG2之問對巨噬細胞增殖的促進能力無顯著差異(P＞0.05)。當LPX3和LPG2質量濃度為400μg/mL時，巨噬細胞增殖分數(shù)分別為135.90％和143.70％，兩者間存在顯著差異(P＜0.05)。結果表明，新鮮和十制龍眼多糖均對巨噬細胞無毒性作用，且具有促進其增殖的作用；在400μg/mL時，LPG2促進巨噬細胞增殖的能力更強。

2.4 LPX3和LPG2對巨噬細胞吞噬能力的影響

如圖4所示，與空白對照組相比，LPX3和LPG2隨著質量濃度的增加(50～400μg/mL)，巨噬細胞的吞噬分數(shù)顯著增加(P＜0.05)。在LPX3和LPG2質量濃度為400μg/mL時，吞噬分數(shù)分別為192.03％和198.28％，兩者問無顯著差異(P＞0.05)。結果表明，LPX3和LPG2均能有效促進巨噬細胞吞噬抗原。巨噬細胞的活化在機體免疫應答過程中扮演著重要角色，吞噬能力的增強是其活化的標志之一。巨噬細胞通過吞噬清除受損細胞或外來抗原，誘導細胞分泌IL-1B、TNF-α等細胞因子調節(jié)機體免疫阻。有報道顯示龍眼多糖組分和硫酸化修飾的龍眼多糖組分能顯著增強巨噬細胞的吞噬能力。

2.5 LPX3和LPG2對巨噬細胞分泌NO的影響

NO作為一種重要的細胞信號分子，廣泛參與細胞和機體的免疫調節(jié)。如圖5所示，與空白對照組相比，NO分泌量隨著LPX3質量濃度的增加而顯著增加(P＜0.05)。LPG2在25～200μg/mL范同內，能顯著促進NO分泌(P＜0.05)。當LPX3和LPG2的質量濃度均為200μg/mL時，NO分泌量分別為空白對照組的5.4倍和5.6倍，兩者問無顯著差異(P＞0.05)。結果表明，25～200μg/mL的LPX3和LPG2引起了細胞促炎信號分子NO分泌量的顯著改變，可能誘導了巨噬細胞相關信號通路的激活。同時，研究顯示炎癥因子的過度釋放會誘導機體的炎癥因子風暴，對機體造成損傷，LPX3和LPG2促進巨噬細胞分泌NO的活性有待進一步研究。

2.6 LPX3和LPG2對巨噬細胞分泌細胞因子的影響

如圖6所示，與空白對照組相比，LPX3和LPG2(25～400μg/mL)可誘導巨噬細胞分泌IL-6和TNF-α，并呈現(xiàn)出一定劑量關系。當質量濃度為400μg/mL時，TNF-α的分泌量分別為空白對照組的17.67倍(296.20pg/mL)和H31.54倍(528.65μg/mL)，兩者具有顯著性差異(P＜0.05)：IL-6的分泌量分別為空白對照組的18.42倍(73.69pg/mL)和27.31倍(109.22pg/mL)，兩者具有顯著性差異(P＜0.05)。結果表明，LPX3和LPG2均能顯著促進巨噬細胞分泌TNF-α和IL-6。當質量濃度為400μg/mL時，LPG2促進巨噬細胞分泌IL-6和TNF-α的能力更強。IL-6和TNF-α在宿主防御病原體和急性應激中起著關鍵作用。巨噬細胞IL-6和TNF-α分泌量的增加可能與細胞的激活和防御有一定關系。

3 結語

作者采用小鼠腸系膜淋巴結細胞和巨噬細胞模型，比較了LPX3和LPG2誘導細胞增殖和細胞因子分泌的活性。結果表明，LPX3和LPG2均能促進小鼠腸系膜淋巴結細胞增殖和激活巨噬細胞，且具有劑量依賴性的促進巨噬細胞吞噬和誘導細胞分泌IL-6、TNF-α。同時，與LPX3相比，LPG2表現(xiàn)出更強的激活巨噬細胞的活性。

多糖的生物活性與其結構密切相關，新鮮和干制龍眼果肉多糖的分子結構差異及其激活巨噬細胞的分子機制差異還有待進一步研究。

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