白扁豆花是豆科扁豆屬植物扁豆Dolichos lablab L.的干燥花，呈扁平不規(guī)則三角形，具有解暑化濕、和中健脾之功效，用于治療痢疾、泄瀉、赤白帶下等癥，在我國具有悠久的應(yīng)用歷史。經(jīng)典名方“新加香薷飲”中采用的是鮮白扁豆花，而有的則采用的是干扁豆花，兩者內(nèi)在成分的差異可能決定了其藥效的差異。本項(xiàng)研究的目的在于研究鮮白扁豆花、凍干白扁豆花和曬干白扁豆花的成分差異，為凍干扁豆花替代鮮扁豆花提供科學(xué)的數(shù)據(jù)支持，同時(shí)，通過氣相質(zhì)譜(GC-MS)方法對鮮白扁豆花的揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行鑒定，這些揮發(fā)性成分的鑒定，為白扁豆花的藥理和臨床應(yīng)用提供基礎(chǔ)支持。

1 材料

1.1 儀器與試劑

Agilent7890B氣相(GC)色譜儀，Agilent 7890B-7000C GC-MS聯(lián)用儀(配有Mass Hunter質(zhì)譜工作站， NIST 14標(biāo)準(zhǔn)譜庫),中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)2012版本；甲醇(色譜純)。

1.2 樣品

白扁豆花采自于河北中醫(yī)學(xué)院藥草園，白扁豆種子經(jīng)河北中醫(yī)學(xué)院王乾老師鑒定為Dolichos lablab L.的種子。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品的處理

2.1.1 鮮白扁豆花：

摘取鮮白扁豆花立即置于-80℃低溫冰箱中，冷凍，而后于液氮中研碎，稱取1 g, 加入25 mL容量瓶中，加入15 mL甲醇，回流30 min, 放冷至室溫，用甲醇定容至刻度，搖勻，過0.45 μm濾膜，進(jìn)樣1 μL 進(jìn)行測定。

2.1.2 凍干白扁豆花：

摘取鮮白扁豆花立即置于-80 ℃低溫冰箱中，而后于冷凍干燥機(jī)內(nèi)凍干，研碎，稱取1 g, 加入25 mL容量瓶中，加入15 mL甲醇，回流30 min, 放冷至室溫，用甲醇定容至刻度，搖勻，過0.45 μm濾膜，進(jìn)樣1 μL 進(jìn)行測定。

摘取鮮白扁豆花，曬干，研碎，稱取1 g, 加入25 mL容量瓶中，加入15 mL甲醇，回流30 min, 放冷至室溫，用甲醇定容至刻度，搖勻，過0.45 μm濾膜，進(jìn)樣1 μL 進(jìn)行測定。

2.2 GC色譜條件

2.2.1 GC色譜指紋圖譜條件：

DB-1毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);程序升溫：柱初始溫度為80 ℃,以10 ℃ /min的速率升至300 ℃,保持10 min; 進(jìn)樣口溫度：300 ℃;載氣：N2;載氣流速：1 mL/min; 分流比：20 ∶1。

2.2.2 GC-MS色譜條件：

色譜柱、升溫程序同GC色譜指紋圖譜條件；載氣：He; 載氣流速：1 mL/min; 分流比：100 ∶1。EI離子源；離子源溫度：230 ℃;四極桿溫度：150 ℃;電子能量：70 eV;接口溫度：280 ℃;質(zhì)量范圍：50～600 m/z。

3 結(jié)果與討論

3.1 方法學(xué)研究

主要針對進(jìn)樣精密度、樣品重復(fù)配制后的重復(fù)性以及樣品溶液的穩(wěn)定性進(jìn)行研究，以鮮扁豆花為研究對象，將所得的圖譜導(dǎo)入中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)(2012版),通過各色譜圖之間相似度比值，進(jìn)而確定方法的適用性。本方法的精密度、重復(fù)性和穩(wěn)定性研究相似度均在0.99以上，說明方法適用性良好。

3.2 各類白扁豆花成分的差異

對鮮白扁豆花、凍干白扁豆花和干扁豆花的成分進(jìn)行分析，每個(gè)種類的樣品分別重復(fù)檢測3次，采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)(2012版)對結(jié)果進(jìn)行分析。分析結(jié)果見圖1、表1。

從圖1的結(jié)果可以看出，鮮白扁豆花、凍干白扁豆花和干白扁豆花種類內(nèi)部之間，差異較小，說明該方法的重現(xiàn)性較好；鮮白扁豆花和凍干白扁豆花之間的相似度在0.950以上，說明相似度非常接近；鮮白扁豆花和干白扁豆花之間的相似度在0.720左右，有較大的差異。根據(jù)氣相圖譜可以看出，鮮白扁豆花、凍干白扁豆花和干扁豆花之間成分的種類并無顯著的差異，僅是成分的含量差異較大。從提取溶液的顏色來看，鮮白扁豆花和凍干白扁豆花為綠黃色，而干白扁豆花為淺黃色。

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