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大腸克隆菌ET12567(pUZ8002) 化學(xué)感受態(tài)細胞
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大腸克隆菌ET12567(pUZ8002) 化學(xué)感受態(tài)細胞

ET12567(pUZ8002) Chemically Competent Cell
  • 價格: ¥600
  • 編號:BNCC373750
  • 交付:一至兩周
  • 品牌:BNCC
規(guī)格:
  • 凍存管
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基本信息 相關(guān)資源
培養(yǎng)基 酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,氯化鈉:10.0,瓊脂:15.0,pH:7.0±0.2(25℃)
傳代方法 1.大腸克隆菌ET12567(pUZ8002) 感受態(tài)細胞放置冰中融化 (或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅 速插入冰中) ,加入目的 DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手撥打 EP 管底輕輕混勻,冰上靜置 25 分鐘。 2.42℃水浴熱激 45 秒,迅速放回冰上并靜置 2 分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。 3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基LB,混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。 4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的LB培養(yǎng)基上(培養(yǎng)時需要加入25 μg/mL氯霉素和25 μg/mL卡那霉素以維持細胞內(nèi)pUZ8002伴侶質(zhì)粒的存在)。 5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少17h。
生長條件 37℃;18-24h;好氧
存儲條件 -80℃
安全等級 0
共享方式 公益性共享
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