北方偉業(yè)計量集團有限公司
| 培養(yǎng)基 | 酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，氯化鈉：10.0，瓊脂：15.0，pH：7.0±0.2（25℃） |
| 傳代方法 | 1.取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于冰上待其部分融化，處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。 2.每100μl感受態(tài)加1ug（體積不大于10ul）質(zhì)粒DNA，用手撥打管底混勻，依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、28℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。 3.加入700μl無抗生素的LB液體培養(yǎng)基，于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。 4.6000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB平板上，倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天（當(dāng)平板只含有50ug/ml kan 時，28℃培養(yǎng)48h即可；平板中同時加入50ug/ml kan，20ug/ml rif 時，需28℃培養(yǎng)60h；如果使用的平板含有50ug/ml rif 則需要28℃培養(yǎng)72-90h）。 |
| 生長條件 | 28℃；18-24h；好氧； |
| 存儲條件 | -80℃ |
| 安全等級 | 1 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
pVAX1
(pVAX1)
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pCMV-HA-Ub
(pCMV-HA-Ub)
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(Escherichia coli Stbl3（LentiCRISPR V2）)
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(Escherichia coli DH5ɑ（pLVX-IRES-puro）)
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(Lemo21(DE3)Chemically Competent Cell)
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DH5α（含pCDNA3.1+質(zhì)粒）大腸桿菌
(Escherichia coli DH5α（pCDNA3.1+）)
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