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pGL4.29[luc2P-CRE-Hygro]
  • pGL4.29[luc2P-CRE-Hygro]-偉業(yè)計(jì)量

pGL4.29[luc2P-CRE-Hygro]

pGL4.29[luc2P-CRE-Hygro]
  • ¥500
  • 編號:BNCC357509
  • 形式:質(zhì)粒干粉
  • 交付:當(dāng)天
  • 品牌:BNCC
  • 用途:
    pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro] 載體 (a–f) 包含一個(gè) cAMP 反應(yīng)元件 (CRE),可驅(qū)動(dòng)熒光素酶報(bào)告基因 luc2P (Photinus pyralis) 的轉(zhuǎn)錄。luc2P 是一種合成來源的熒光素酶序列,具有人源密碼子優(yōu)化功能,專為高表達(dá)和減少異常轉(zhuǎn)錄而設(shè)計(jì)。luc2P 基因包含 hPEST,一種蛋白質(zhì)不穩(wěn)定序列。誘導(dǎo)時(shí),luc2P 編碼的蛋白質(zhì)比 luc2 基因編碼的蛋白質(zhì)反應(yīng)更快。載體骨架包含一個(gè)氨芐青霉素抗性基因,允許在大腸桿菌中進(jìn)行選擇,以及一個(gè)用于潮霉素抗性的哺乳動(dòng)物選擇標(biāo)記物。
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基本信息 相關(guān)資源
培養(yǎng)基 酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法 1.溶解: 收到質(zhì)粒干粉后,請加入 20μl 無菌水至管底,溶解質(zhì)粒,室溫靜置 1min; 2.混合(吸附質(zhì)粒): 200μl 感受態(tài)細(xì)胞 + 質(zhì)粒 DNA 5~10µl 混勻,冰上放置 30min; 3.熱激導(dǎo)入: 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fù)培養(yǎng): 毎管加 800µl LB 液體培養(yǎng)基,37 ℃培養(yǎng) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yǎng): 將適當(dāng)體積(100 µl)的復(fù)蘇細(xì)胞,涂布在相應(yīng)抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(瓊脂面務(wù)必干燥后), 倒置培養(yǎng) 12-16h,出現(xiàn)菌落。 7.提?。? 挑取單克隆菌落至相應(yīng)抗性 LB 液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng) 12-16h,根據(jù)試驗(yàn)需要提取質(zhì)粒。
生長條件 LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,6084bp)
存儲(chǔ)條件 2-8℃
安全等級 0
應(yīng)用領(lǐng)域 pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro] 載體 (a–f) 包含一個(gè) cAMP 反應(yīng)元件 (CRE),可驅(qū)動(dòng)熒光素酶報(bào)告基因 luc2P (Photinus pyralis) 的轉(zhuǎn)錄。luc2P 是一種合成來源的熒光素酶序列,具有人源密碼子優(yōu)化功能,專為高表達(dá)和減少異常轉(zhuǎn)錄而設(shè)計(jì)。luc2P 基因包含 hPEST,一種蛋白質(zhì)不穩(wěn)定序列。誘導(dǎo)時(shí),luc2P 編碼的蛋白質(zhì)比 luc2 基因編碼的蛋白質(zhì)反應(yīng)更快。載體骨架包含一個(gè)氨芐青霉素抗性基因,允許在大腸桿菌中進(jìn)行選擇,以及一個(gè)用于潮霉素抗性的哺乳動(dòng)物選擇標(biāo)記物。
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