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  • ¥500
  • 編號:BNCC354472
  • 形式:質粒干粉
  • 交付:當天
  • 品牌:BNCC
  • 用途:
    大腸桿菌基因敲除質粒
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基本信息 相關資源
培養(yǎng)基 酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法 1.溶解: 收到質粒干粉后,請加入 20μl 無菌水至管底,溶解質粒,室溫靜置 1min; 2.混合(吸附質粒): 200μl 感受態(tài)細胞 + 質粒 DNA 5~10µl 混勻,冰上放置 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培養(yǎng): 毎管加 800µl LB 液體培養(yǎng)基,37 ℃培養(yǎng) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yǎng): 將適當體積(100 µl)的復蘇細胞,涂布在相應抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(瓊脂面務必干燥后), 倒置培養(yǎng) 12-16h,出現(xiàn)菌落。 7.提取: 挑取單克隆菌落至相應抗性 LB 液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng) 12-16h,根據試驗需要提取質粒。
生長條件 LB +氨芐青霉素,30℃(克隆菌株DH5a,9028bp)
存儲條件 2-8℃
安全等級 1
應用領域 大腸桿菌基因敲除質粒
共享方式 公益性共享
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