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  • ¥500
  • 編號(hào):BNCC342042
  • 形式:質(zhì)粒干粉
  • 交付:當(dāng)天
  • 品牌:BNCC
  • 用途:
    pMDLg/pRRE是第三代慢病毒包裝輔助質(zhì)粒,載有病毒gag和pol基因。 pMDLg/pRRE與pRSV-Rev(JY03037)和pMD2.G(JY03027)構(gòu)成第三代慢病毒包裝系統(tǒng),用于包裝第三代慢病毒載體質(zhì)粒,這4個(gè)質(zhì)粒組成四質(zhì)粒系統(tǒng)(即第三代慢病毒系統(tǒng))。 將這4個(gè)質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染293T等細(xì)胞以包裝重組慢病毒,用此慢病毒感染目的細(xì)胞,即可實(shí)現(xiàn)基因敲除、敲降和過表達(dá)等。
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基本信息 相關(guān)資源
培養(yǎng)基 酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法 1.溶解: 收到質(zhì)粒干粉后,請(qǐng)加入 20μl 無菌水至管底,溶解質(zhì)粒,室溫靜置 1min; 2.混合(吸附質(zhì)粒): 200μl 感受態(tài)細(xì)胞 + 質(zhì)粒 DNA 5~10μl 混勻,冰上放置 30min; 3.熱激導(dǎo)入: 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fù)培養(yǎng): 毎管加 800μl LB 液體培養(yǎng)基,37 ℃培養(yǎng) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yǎng): 將適當(dāng)體積(100 μl)的復(fù)蘇細(xì)胞,涂布在相應(yīng)抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(瓊脂面務(wù)必干燥后), 倒置培養(yǎng) 12-16h,出現(xiàn)菌落。 7.提?。? 挑取單克隆菌落至相應(yīng)抗性 LB 液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng) 12-16h,根據(jù)試驗(yàn)需要提取質(zhì)粒。
生長(zhǎng)條件 LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株Stbl3,8890bp)
存儲(chǔ)條件 2-8℃
安全等級(jí) 1
應(yīng)用領(lǐng)域 pMDLg/pRRE是第三代慢病毒包裝輔助質(zhì)粒,載有病毒gag和pol基因。 pMDLg/pRRE與pRSV-Rev(JY03037)和pMD2.G(JY03027)構(gòu)成第三代慢病毒包裝系統(tǒng),用于包裝第三代慢病毒載體質(zhì)粒,這4個(gè)質(zhì)粒組成四質(zhì)粒系統(tǒng)(即第三代慢病毒系統(tǒng))。 將這4個(gè)質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染293T等細(xì)胞以包裝重組慢病毒,用此慢病毒感染目的細(xì)胞,即可實(shí)現(xiàn)基因敲除、敲降和過表達(dá)等。
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