北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
| 培養(yǎng)基 | 90%RPMI-1640+10%FBS |
| 傳代方法 | 復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速?zèng)]入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1min內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液，用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③然后將細(xì)胞懸液加入到含有6-8mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代：①將培養(yǎng)液（含懸浮細(xì)胞）吸至離心管中，1000rpm條件下離心5min，收集細(xì)胞；②用PBS輕輕潤(rùn)洗T25瓶?jī)杀楹?，加?-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。③將上述兩步操作所得細(xì)胞混勻在一起后按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)，重復(fù)傳代操作或者凍存。 |
| 生長(zhǎng)條件 | 37℃；5%CO2+95%空氣； |
| 生長(zhǎng)特性 | 半貼半懸生長(zhǎng) |
| 存儲(chǔ)條件 | 液氮 |
| 安全等級(jí) | 2 |
| 形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣，短梭形，多角形，圓形，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長(zhǎng) |
| 分離基物 | 肝臟 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 大體上，原始腫瘤是單個(gè)結(jié)節(jié)狀，伴結(jié)節(jié)周?chē)鷶U(kuò)展。組織學(xué)上為小梁型。培養(yǎng)的細(xì)胞是多核的，并維持原始腫瘤中所見(jiàn)的胞質(zhì)內(nèi)透明小球的產(chǎn)生。通過(guò)Southern印跡雜交檢測(cè)乙型肝炎病毒(HBV) DNA。HBV基因組RNA未表達(dá)。 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書(shū)下載 | 說(shuō)明書(shū)文件 支原體檢測(cè)報(bào)告 |
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