北方偉業(yè)計量集團有限公司
| 培養(yǎng)基 | RPMI-1640完全培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%FBS |
| 傳代方法 | 復蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中，迅速沒入 37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以 1 分鐘內全部 溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有 9ml 完全培養(yǎng)基的離心管內，1000-1200rpm/min 離心 5 分鐘，棄去 上清液，用 1-2mL 完全培養(yǎng)基重懸細胞。③然后將細胞懸液加入到含有 5-6mL 完全培養(yǎng)基的 T25 瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS 清洗兩遍后，加入 1-2mL 胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況， 在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見細胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù) 消化），直接吸掉胰酶，加入 5-6 毫升完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。③將細胞懸液按 1:2 比例分到 新的 T25 瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基 pH 值變化和細胞密度，定期換 液（每周 2-3 次），待細胞密度達到 80%-90%時，重復傳代操作或者凍存。 |
| 生長條件 | 培養(yǎng)溫度37℃；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣； |
| 生長特性 | 貼壁生長 |
| 存儲條件 | 液氮 |
| 安全等級 | 1 |
| 形態(tài) | 上皮細胞樣，多角形，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長 |
| 分離基物 | 該細胞株源自肺支氣管黏液上皮樣癌的淋巴結轉移灶；先用成份限定的培養(yǎng)基分離得到，然后換成含血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)。培養(yǎng)條件下該細胞保留了黏液上皮的特性，可從其超微結構的表現(xiàn)和多種鱗狀上皮分化標記的表達而判斷。 |
| 應用領域 | 該細胞支持HBV的生長，左旋多巴脫羧酶陰性。該細胞可以作為篩選模型，將人類亞基因組片段轉染入細胞來研究HBV及其自身基因在病毒性肝炎和肝癌發(fā)生中的作用。該細胞角蛋白、波形蛋白、黏液洋紅染色陽線，但神經(jīng)絲三聯(lián)蛋白陰性。 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書下載 | 說明書文件 支原體檢測報告 |
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