北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
| 培養(yǎng)基 | 90%DMEM-H+10%FBS |
| 傳代方法 | 復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃中取出放入PE手套中，迅速?zèng)]入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1分鐘內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9ml 完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm/min離心5分鐘，棄去上清液，用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③然后將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，肉眼可見細(xì)胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶，加入5-6毫升完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)，重復(fù)傳代操作或者凍存。 |
| 生長(zhǎng)條件 | 培養(yǎng)溫度37℃；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣； |
| 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
| 存儲(chǔ)條件 | 液氮 |
| 安全等級(jí) | 1 |
| 形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣，梭形 |
| 分離基物 | 胚胎 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 該系產(chǎn)生了一種可以感染小鼠細(xì)胞的載體。Psi2 DAP 細(xì)胞產(chǎn)生編碼人胎盤堿性磷酸酶基因和新霉素抗性基因的載體。該細(xì)胞系通過插入重組逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組 (DAP) 衍生自 Psi2 細(xì)胞。用 Psi2 DAP 細(xì)胞產(chǎn)生的載體感染的細(xì)胞表達(dá)組織化學(xué)可檢測(cè)的堿性磷酸酶，可用作跟蹤其體內(nèi)命運(yùn)的標(biāo)記。細(xì)胞可產(chǎn)生輔助病毒。 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書下載 | 說明書文件 支原體檢測(cè)報(bào)告 |
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