關(guān)于保護(hù)柱，通常大家會(huì)擔(dān)心：

保護(hù)柱會(huì)不會(huì)造成選擇性變化？

保護(hù)柱會(huì)不會(huì)造成柱效/分離度下降？特別是精細(xì)分析？

好的保護(hù)柱，是不是很貴？

如何選擇保護(hù)柱？

在使用保護(hù)柱的時(shí)候應(yīng)該注意些什么？

在高效液相分析檢測(cè)樣品的過程中，色譜柱會(huì)受到來(lái)自于樣品及色譜系統(tǒng)的污染，從而導(dǎo)致色譜柱耐用性差、壽命縮短。

來(lái)自于色譜系統(tǒng)的污染主要指，HPLC儀器系統(tǒng)中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒，以及流動(dòng)相系統(tǒng)過濾不完全殘留的固體顆粒。來(lái)自于樣品的污染主要指，未完全溶解的樣品或者已完全溶解的樣品進(jìn)入色譜系統(tǒng)中，由于樣品溶劑和流動(dòng)相溶劑對(duì)樣品溶解存在的溶解度差異，導(dǎo)致沉淀析出污染系統(tǒng)。

特別是對(duì)于中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測(cè)，因基質(zhì)的復(fù)雜性，色譜柱受污染的情況會(huì)更加嚴(yán)重。污染會(huì)導(dǎo)致色譜系統(tǒng)壓力升高、色譜柱塌陷、填料變色等，從而帶來(lái)檢測(cè)成本高，測(cè)試結(jié)果不準(zhǔn)確等各種影響。

保護(hù)柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材，使用保護(hù)柱可大大降低分析柱受污染的程度，延長(zhǎng)分析柱使用壽命。

保護(hù)柱位于進(jìn)樣器與分析柱之間， 作用主要兩方面：

1. 截留不溶性顆粒 

2. 吸附樣品基質(zhì)中的雜質(zhì)

如何選擇保護(hù)柱？

1. 保護(hù)柱的填料，與分析柱保持一致！填料品牌一致，才能100%確保選擇性一致。

2.保護(hù)柱的規(guī)格，要與分析柱匹配！填料粒徑一致，保護(hù)柱的內(nèi)徑與分析柱的內(nèi)徑相近。

3.對(duì)于精細(xì)分離，保護(hù)柱本身的裝填柱效要足夠好！

4.對(duì)于精細(xì)分離或者小內(nèi)徑色譜柱分離，保護(hù)柱的連接死體積要盡可能小。

5.如果是用于UHPLC柱，還要考慮保護(hù)柱的耐壓能力。

保護(hù)柱不理想，就會(huì)導(dǎo)致峰擴(kuò)散，分離度下降，不利于精細(xì)分離。

理想的保護(hù)柱，即使分析柱短小如4.6×100mm，安裝保護(hù)柱后也未引起分離度與峰高的降低。

如何使用保護(hù)柱？

1.專柱專用。避免保護(hù)柱成為不同項(xiàng)目的交叉污染源。

2.及時(shí)更換保護(hù)柱。當(dāng)峰的理論塔板數(shù)下降15%，或是柱壓上升15%，或是關(guān)鍵分離度下降15%時(shí)，都應(yīng)該及時(shí)更換保護(hù)柱。

3.不慎發(fā)生強(qiáng)污染時(shí)。可以將分析柱卸下，單獨(dú)沖洗保護(hù)柱，可以使污染物更快的從保護(hù)柱中流出。——但是不可以超聲保護(hù)柱。

保護(hù)柱使用注意事項(xiàng)

1.獨(dú)立式保護(hù)柱與分析柱連接時(shí)，連接管路盡可能短，且接口切面平滑，盡量減少死體積以降低柱外展寬效應(yīng)。

2.卡套式保護(hù)柱一般未標(biāo)注液流方向，使用時(shí)最好自行標(biāo)注，并按照標(biāo)注方向來(lái)使用，以免正反向使用后，截留的雜質(zhì)污染分析柱。

3. 直接填裝的短柱型保護(hù)柱，出現(xiàn)柱壓升高或峰型變差時(shí)，可不接分析柱進(jìn)行反向清洗，清洗溶劑可參考分析柱清洗溶劑。

4. 卡套式保護(hù)柱，柱芯替換時(shí)，注意柱芯與柱套是否存在方向上的匹配，同時(shí)不易旋擰過緊，以防滑絲。

5. 保護(hù)柱或柱芯一般不建議超聲清洗，因可能對(duì)填料表面修飾有影響。

6. 如同一保護(hù)柱配不同的分析柱使用，每次使用前，保護(hù)柱需先清洗并用流動(dòng)相平衡保護(hù)柱一段時(shí)間后，再接分析柱使用。

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