滿山紅來源于杜鵑花科杜鵑屬植物興安杜鵑(Rhododendron dauricum L.)的葉。滿山紅在治療咳喘方面效果突出，常用來治療慢性氣管炎，慢性支氣管炎等[2]。滿山紅以黃酮類、香豆素類、有機(jī)酸類、揮發(fā)油類等化學(xué)成分為主，其中藥效作用突出的是黃酮類[3]，包括杜鵑素、山奈酚、金絲桃苷等。中藥材含有的化學(xué)成分復(fù)雜，影響其化學(xué)成分種類和含量的因素也很多，因此需要規(guī)范中藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。中藥指紋圖譜可以使得到的有用化學(xué)信息最大化，起到把控中藥產(chǎn)品的質(zhì)量的作用[4]。因此建立中藥指紋圖譜意義重大，也為后續(xù)中藥材研究奠定基礎(chǔ)。

1 儀器與材料

1.1 主要儀器
美國(guó)Agilent公司的1260型高效液相色譜儀；美國(guó)THERMO公司的G10S UV-Vis型紫外分光光度計(jì)；昆山市超聲儀器有限公司的KQ-250DE型醫(yī)用數(shù)控超聲波清洗器；德國(guó)賽多利斯公司的BP211D型天平(d=0.01 mg)；天津市泰斯特儀器有限公司的98-1-B型電子控溫電熱套。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料

1.2.1 試劑

實(shí)驗(yàn)中高效液相色譜儀使用的是美國(guó)Fishers公司生產(chǎn)的色譜級(jí)甲醇、乙腈和甲酸，水為超純水；除此之外實(shí)驗(yàn)用到的試劑為分析純。

1.2.2 試藥

杜鵑素(批號(hào)：201605)為中國(guó)藥品生物制品檢定所生產(chǎn)。

1.2.3 飲片來源

滿山紅藥材購(gòu)于黑龍江五林、黑龍江林口、吉林通化，每個(gè)產(chǎn)地5批藥材，分別是五林01～05、林口01～05、通化01～05，共15批，編號(hào)分別是S1～S15。由中國(guó)科學(xué)院長(zhǎng)春應(yīng)用化學(xué)研究所質(zhì)譜中心皮子鳳副研究員鑒定為興安杜鵑Rhododendron dauricum L.葉。

2 方法與結(jié)果

2.1 對(duì)照品溶液的制備

將杜鵑素對(duì)照品精密稱量，取適量甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液，即得。

2.2 供試品溶液的制備

選用滿山紅葉100 g，采用回流法提取2回，第1回加入12倍水，放置30 min，回流提取30 min，過200目濾布，濾液備用；藥渣第2回加入10倍水，提取20 min，過200目濾布，合并2次濾液，減壓濃縮至500 mL，凍干，取凍干粉0.1 g，加入20 mL水超聲提取(功率100W，頻率40 KHz)60 min，放至室溫，搖勻，過0.45 μm的微孔濾膜，即得。

2.3 色譜條件的確定

2.3.1 色譜條件

采用Shim-Pack XR-ODS Ⅲ (2.0 mmi.d×150 mm)色譜柱，用甲醇-0.3%甲酸水溶液為流動(dòng)相系統(tǒng)梯度洗脫，流速為0.2 mL·min-1，梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為297 nm，柱溫為25 ℃，進(jìn)樣量為10 μL。梯度見表1。

2.3.2 空白溶劑干擾考察

將甲醇作為空白溶劑，按照“2.3.1”項(xiàng)色譜條件，開始檢測(cè)。滿山紅葉的指紋圖譜不受空白溶劑影響。見圖1。

2.3.3 對(duì)照品和供試品峰比對(duì)

將“2.1”項(xiàng)的對(duì)照品溶液和“2.2”項(xiàng)的供試品溶液，按照“2.3.1”項(xiàng)的色譜條件，用高效液相色譜儀檢測(cè)。結(jié)果顯示所選藥材中含有杜鵑素。對(duì)照品色譜圖見圖2，供試品色譜圖見圖3。

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相關(guān)鏈接：黃酮，山奈酚，杜鵑素