2.2千年草提取物細胞內ROS清除活性

隨著千年草提取物濃度的升高人皮膚成纖維細胞ROS活性逐漸被抑制，其中，50μg/ml，100μg/ml濃度的千年草籽乙醇提取物的ROS清除活性最強，見表4。

2.3千年草提取物的細胞增殖作用

隨著千年草提取物濃度的升高人皮膚成纖維細胞的增殖率逐漸升高，與1μg/ml千年草熱水提取物和乙醇提取物相比，10μg/ml以上濃度的對應部分的千年草提取物能夠使人皮膚成纖維細胞的增殖率顯著上升(P<0.05)，且100μg/ml千年草籽的乙醇提取物和熱水提取物的促進作用最強，見表4。

2.4千年草提取物對膠原蛋白合成的影響

隨著千年草提取物濃度的升高人皮膚成纖維細胞膠原蛋白合成率逐漸增強(P<0.05)，其中，濃度為50μg/ml的千年草籽熱水提取物膠原蛋白合成率最高，見表5。

3討論

仙人掌含有多種多糖、生物堿、黃酮類、化黃酮合物、皂苷、蔽類等活性成分，本研究分別采用熱水浸提和乙醇浸提，提取物主要成分可能為粗多糖、多酚類、黃酮類物質，這類物質均具有良好的抗氧化活性。國內常見的米邦塔、仙巴掌、梨果仙人掌、量天和仙人掌都具有良好的清除自由基能力，文獻報道這4種仙人掌的羥自由基清除活性低于蘆丁。本研究發(fā)現(xiàn)千年草提取物均具有清除DPPH、ABTS自由基活性，但其活性弱于同濃度的VC，各種提取物中，千年草籽乙醇提物的清除DPPH、ABTS自由基能力最強，IC50濃度最低。ROS是一種強氧化劑，是細胞內代謝后的有害產(chǎn)物，活性氧包括氧自由基、丙二醛等，可以對脂質造成過氧化，損害細胞的脂質雙分子層，加速細胞衰老，損害細胞功能，過量的ROS會損害膠原蛋白，引起皮膚松弛、產(chǎn)生皺紋，過量的ROS還會引起機體內氧化應激反應過度，引起多種疾病。本研究結果表明千年草熱水提取物和乙醇提取物對人皮膚成纖維細胞ROS活性均具有抑制作用，其中千年草籽乙醇提取物的ROS抑制作用最強，說明千年草仙人掌具有一定的抗氧化、清除自由基能力，這與Cho等報道有相似之處。但對于其發(fā)揮抗氧化清除自由基的具體有效成分還需進一步研究。

皮膚衰老和皮膚受損后的修復是一個復雜的生物學過程，成纖維細胞能夠合成I型膠原蛋白活性，是重要的修復細胞之一。皮膚修復的生物過程通常是由成纖維細胞的增殖分化來完成的，人皮膚成纖維細胞是研究膠原蛋白、皮膚衰老的常用細胞模型。研究認為人皮膚成纖維細胞的膠原蛋白分泌量在1w左右達到峰值。本研究發(fā)現(xiàn)千年草提取物在10μg/ml以上時對人皮膚成纖維細胞增殖均有一定的促進作用，且隨著濃度增加，其促進作用增強，同一濃度的不同提取方法及不同部位千年草提取物對人皮膚成纖維細胞的增殖作用無顯著差異，說明千年草提取物無明顯細胞毒性，且對Ⅰ型膠原蛋白的合成具有促進作用，隨著濃度增加，促進作用增強，濃度為50μg/ml的千年草籽熱水提取物膠原蛋白增加率最高。牟麗秋等采用杜仲提取液與MC3T3-EI成骨細胞在體外進行共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)杜仲提取液具有促進細胞增殖、分化的作用，認為京尼平苷和綠原酸是促進其增殖的主要有效成分，京尼平苷和桃葉珊瑚苷是促進大鼠膠原蛋白合成的有效成分。ROS會促進膠原蛋白凋亡，引起細胞損傷，千年草提取物具有清除ROS活性，這可能是其對人皮膚成纖維細胞的增殖作用及對Ⅰ型膠原蛋白活性的促進作用、抗衰老的原因之一。

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