北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
食品安全是一項(xiàng)需要重點(diǎn)關(guān)注的民生工程。目前,我國(guó)的食品安全問題仍以農(nóng)獸藥殘留、致病菌、非法添加劑等為主。其中,農(nóng)藥殘留因其廣泛性、多樣性備受關(guān)注。全世界開發(fā)的農(nóng)藥種類(有效成分)有1500 種以上,按其化學(xué)成分可分為有機(jī)磷類、有機(jī)氯類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類、苯氧乙酸類、有機(jī)錫類等。農(nóng)藥使用不當(dāng)?shù)仍虺3T斐赊r(nóng)藥殘留超標(biāo),而農(nóng)藥殘留對(duì)人體健康危害巨大,會(huì)造成急性中毒或慢性中毒,降低人體免疫力、可致癌、致畸和致突變,甚至造成個(gè)體死亡,而且還會(huì)影響農(nóng)產(chǎn)品的對(duì)外貿(mào)易,也會(huì)對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重的污染。
目前,農(nóng)藥殘留的檢測(cè)主要分為以下幾種:(1)儀器分析方法,包括液相色譜儀、氣相色譜法等,這些方法精密度高,但儀器昂貴;(2)免疫分析方法,包括酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、膠體金免疫層析法等,ELISA方法檢測(cè)通量高,但需要多步操作和洗滌,膠體金免疫層析法簡(jiǎn)單易操作,但靈敏度不足。這些方法均不能滿足食品中痕量農(nóng)藥殘留的快速靈敏檢測(cè)。因此,迫切建立一種快速、靈敏、簡(jiǎn)便的農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法用于保障食品安全。
基于此需求,陳翊平教授課題組將啶蟲脒農(nóng)藥的酶抑制特性與順磁離子轉(zhuǎn)化體系相結(jié)合,構(gòu)建了一種一步混合的雙酶介導(dǎo)Fe2+/Fe3+磁弛豫傳感器,并將其用于果蔬樣品中啶蟲脒的快速高靈敏檢測(cè)。
(1)研究方法
本工作基于農(nóng)藥啶蟲脒的酶抑制特性構(gòu)建了雙酶介導(dǎo)的Fe2+/Fe3+磁弛豫傳感體系。乙酰膽堿酯酶(AChE) 底物氯化乙酰膽堿(ACh)生成膽堿,膽堿進(jìn)而被膽堿氧化酶(CHO)催化生成過氧化氫,而過氧化氫可以誘導(dǎo)Fe2+/Fe3+的轉(zhuǎn)化,進(jìn)而引起橫向弛豫時(shí)間(T2)的變化。在該方法中,啶蟲脒能夠抑制乙酰膽堿酯酶(AChE)的活性,切斷催化反應(yīng),從而減少膽堿和過氧化氫的產(chǎn)生。而過氧化氫的減少,則會(huì)降低Fe2+/Fe3+的轉(zhuǎn)化程度,進(jìn)而影響磁信號(hào)。因此,可以建立磁信號(hào)與啶蟲脒的相關(guān)性關(guān)系(圖1)。該傳感器具有快速、穩(wěn)定、靈敏等優(yōu)點(diǎn),可歸結(jié)于兩個(gè)因素:(1)水溶液中的Fe2+/Fe3+均勻穩(wěn)定,信號(hào)輸出穩(wěn)定靈敏;(2)雙酶介導(dǎo)的Fe2+/Fe3+轉(zhuǎn)化的級(jí)聯(lián)反應(yīng)只需要“一步混合”,提高了檢測(cè)效率和靈敏度。
(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
本工作首先通過過氧化氫試紙條、高錳酸鉀氧化還原顯色和紫外光譜掃描驗(yàn)證了Fe2+/Fe3+價(jià)態(tài)轉(zhuǎn)化和雙酶介導(dǎo)的H2O2生成體系的可行性(圖2)。在此基礎(chǔ)上,構(gòu)建了基于Fe2+/Fe3+價(jià)態(tài)轉(zhuǎn)化的磁弛豫生物傳感器,并對(duì)氯化乙酰膽堿、乙酰膽堿酯酶和Fe2+的濃度進(jìn)行了優(yōu)化(圖3)。本工作進(jìn)一步對(duì)啶蟲脒進(jìn)行了檢測(cè),并與分光光度法和傳統(tǒng)酶抑制法進(jìn)行了比較。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,F(xiàn)e2+-T2磁弛豫傳感器檢測(cè)啶蟲脒的靈敏度是分光光度法的180倍,是傳統(tǒng)酶抑制法的335倍(圖4)。因此,該傳感器在農(nóng)藥殘留檢測(cè)方面具有良好的分析性能和應(yīng)用潛力。
(3)論文相關(guān)信息
本工作發(fā)表于Journal of Hazardous Materials雜志上(Journal of Hazardous Materials, 2021, 403, 123619, IF=9.0)。
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