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恩施市酸豇豆中乳酸菌多樣性解析及其分離株發(fā)酵特性評價(二)

發(fā)布時間:2021-03-13 11:42 編輯者:周世紅

4、數(shù)據(jù)處理

采用箱形圖對不同處理酸豇豆各滋味品質(zhì)指標(biāo)的差異性進行展示,采用主成分分析(principalcomponentanalysis,PCA)對不同處理酸豇豆品質(zhì)進行評價。使用Origin2017進行箱形圖、PCA因子載荷圖和因子得分圖繪制,使用SAS9.0軟件進行PCA。

二、結(jié)果與分析

1、酸豇豆中乳酸菌的分離鑒定

從6個酸豇豆樣品中本研究分離到23株潛在乳酸菌菌株,所有菌株均為桿狀,且過氧化氫酶實驗和革蘭氏染色實驗分別為陰性和陽性。在提取潛在乳酸菌菌株基因組DNA的基礎(chǔ)上,本研究進一步對其16srDNA序列進行了PCR擴增,同時采用1%瓊脂凝膠電泳對擴增產(chǎn)物進行了檢驗,電泳圖如圖l所示。


c1

由圖1可知,所有泳道中的條帶片段均在1500bp左右,這說明擴增產(chǎn)物為16srDNA序列,此外所有泳道中條帶單一、明亮且無嚴(yán)重拖尾現(xiàn)象,這說明擴增產(chǎn)物的濃度和純度均較高,因而本研究得到的16srDNA序列PCR擴增產(chǎn)物滿足后續(xù)測序要求。在測序公司反饋回序列后,將拼接完成且去掉引物的序列在NCBI網(wǎng)站GenBack數(shù)據(jù)庫中與模式菌株序列進行比對,結(jié)果如表1所示。

c2

c3

由表1可知,菌株HBUAS51008被鑒定為L.plantarum(鼠李糖乳桿菌),菌株HBUAS51014被鑒定為L.fermentum(發(fā)酵乳桿菌),而其他21株菌株被鑒定為L.plantarum(植物乳桿菌),且所有乳酸菌菌株16SrDNA與模式株的同源性均≥99%。本研究進一步構(gòu)建了乳酸菌分離株和模式株的系統(tǒng)發(fā)育樹,如圖2所示。

 

c4

由圖2可知,菌株HBUAS51008與L.rhamnosusNBRC3425形成一個系統(tǒng)發(fā)育樹分支,菌株HBUAS51014與L.fermentumNBRCl5885形成一個系統(tǒng)發(fā)育樹分支,而其他21株菌株與L.plantarumNBRCl589l形成一個系統(tǒng)發(fā)育樹分支,因而本研究的比對結(jié)果具有較高的準(zhǔn)確性和可信度。由圖2亦可知,分離出的23株乳酸菌中21株為L.plantarum,占分離株總數(shù)的91.30%,因而L.plantarum為酸豇豆中的優(yōu)勢乳酸菌。裴樂樂的研究結(jié)果與本研究相同,采用構(gòu)建16SrRNA基因文庫和限制性酶切分型分析(AmplifedRibosomalDNARestrictionAnalysis,ARDRA),其發(fā)現(xiàn)Lactobacillus為四川地區(qū)泡豇豆中的優(yōu)勢細菌之一,相對含量達到17.48%。

2、L.plantarum純種發(fā)酵對酸豇豆風(fēng)味品質(zhì)的影響

在對酸豇豆中乳酸菌進行分離鑒定的基礎(chǔ)上,本研究選取21株L.plantarum純種發(fā)酵進行了酸豇豆樣品的制備,并使用電子鼻這一仿生設(shè)備對其風(fēng)味品質(zhì)進行了評價,結(jié)果如表2所示。

c5

由表2可知,較之對照組,金屬傳感器WlC、W3C、W5C對多數(shù)L.plantarum純種發(fā)酵的酸豇豆響應(yīng)值明顯偏高,而金屬傳感器WlS、WlW、W2S、W2W和W3S則呈現(xiàn)出相反的趨勢。由此可見,L.plantarum純種發(fā)酵可提升多數(shù)酸豇豆揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)中的烷烴和芳香類物質(zhì)含量,而對氫氧化物和有機硫化物等物質(zhì)的生成具有一定抑制作用,L.plantarum純種發(fā)酵有利于提升多數(shù)酸豇豆的風(fēng)味品質(zhì)。劉洪研究結(jié)果與本研究相同,其對乳酸菌純種發(fā)酵和自然發(fā)酵泡豇豆的品質(zhì)進行了評價,結(jié)果表明乳酸菌純種發(fā)酵能縮短酸豇豆成熟周期,且保持了與自然發(fā)酵泡豇豆一致的風(fēng)味。

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