2結(jié)果與分析

2.1液相色譜條件的優(yōu)化

選用C18色譜柱（50mm×2.1mm,1.8μm），設(shè)定流速為0.3mL/min，分別考察了以乙腈-水、甲醇-水、乙腈-0.2%甲酸水溶液和甲醇-0.2%甲酸水溶液為流動(dòng)相時(shí)對(duì)2種化合物檢測(cè)結(jié)果的影響，梯度洗脫程序同1.4.2節(jié)。結(jié)果表明：選用乙腈-0.2%甲酸水為流動(dòng)相時(shí)，2種化合物分離效果較好，能獲得更高的響應(yīng)值和更好的峰形，在此條件下，二氯喹啉酸和二氯喹啉酸甲酯的保留時(shí)間分別為1.71、1.92min（見圖2）。

2.2質(zhì)譜條件的優(yōu)化

以乙腈-0.2%甲酸水溶液作為流動(dòng)相，取0.1mg/L的2種化合物的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行正/負(fù)離子模式全掃描（m/z100～500），二氯喹啉酸和二氯喹啉酸甲酯進(jìn)入一級(jí)質(zhì)譜后，產(chǎn)生穩(wěn)定的[M+H]+準(zhǔn)分子離子峰（二氯喹啉酸m/z224.0，二氯喹啉酸甲酯m/z256.1），該離子為2種化合物的母離子。

通過比較儀器響應(yīng)值發(fā)現(xiàn)，正離子模式下母離子的響應(yīng)值最高，故選用正離子模式進(jìn)行掃描。并在掃描離子檢測(cè)（SIM）模式下掃描，進(jìn)一步優(yōu)化裂解電壓值；在子離子掃描模式下設(shè)定碰撞能，使母離子發(fā)生斷裂或重排，產(chǎn)生不同的離子碎片，進(jìn)入二級(jí)質(zhì)譜；最后在多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）下優(yōu)化碰撞能、駐留時(shí)間等質(zhì)譜參數(shù)（駐留時(shí)間120ms；裂解電壓60V；碰撞能15eV），得到二氯喹啉酸母離子為m/z242.0，定量和定性離子分別為m/z224.0和m/z161.0，二氯喹啉酸甲酯母離子為m/z256.1，定量和定性離子分別為m/z224.0和m/z161.1，在此質(zhì)譜條件下可獲得最佳的靈敏度和分離效果。

2.3前處理方法的優(yōu)化

2.3.1提取溶劑的選擇

在0.1mg/kg質(zhì)量分?jǐn)?shù)添加水平，樣品量均為5g的條件下，比較了甲醇和乙腈2種提取溶劑對(duì)二氯喹啉酸和二氯喹啉酸甲酯的提取效率的影響。結(jié)果表明（見表2）：當(dāng)采用乙腈作為二氯喹啉酸甲酯的提取溶劑時(shí)可以達(dá)到更好的提取效果，添加回收率符合農(nóng)藥殘留分析標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)采用2倍樣品量的甲醇作為二氯喹啉酸提取溶劑時(shí)，能夠獲得更高的回收率。

2.3.2凈化劑的選擇和優(yōu)化

根據(jù)農(nóng)藥和基質(zhì)的性質(zhì)選擇凈化劑，PSA凈化劑化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有能吸附極性化合物的羥基，可以有效去除基質(zhì)中的碳水化合物、糖類、酚類和有機(jī)酸等酸性干擾物以及部分極性色素；C18結(jié)構(gòu)上具有很強(qiáng)的非極性作用，易于吸附如維生素、脂肪、花青素等非極性和中等極性的化合物；GCB主要吸附葉綠素和類胡蘿卜素等具有疏水作用的化合物。

糙米中含有大量的淀粉和少量的脂肪，色素含量較少，所以考察了不同比例的PSA和C18混用的凈化效果。結(jié)果表明：50mgC18+50mgPSA，凈化結(jié)果良好，上清液澄清、回收率為76%～94%。稻殼和稻稈中富含植物纖維和色素[25],GCB作為凈化劑可以有效的除去多余色素，稻殼和稻稈凈化劑在50mgPSA的基礎(chǔ)上加入10、20、30mgGCB，其中50mgPSA作為凈化劑時(shí)，稻殼的凈化效果較好，回收率為77%～94%,50mgPSA+20mgGCB作為稻稈的凈化劑時(shí)，可以滿足不同地區(qū)稻稈樣品的凈化效果，回收率為75%～100%。

2.4方法的確證

2.4.1方法的線性范圍

二氯喹啉酸和二氯喹啉酸甲酯在水稻樣品的3種基質(zhì)中，質(zhì)量濃度與相應(yīng)的峰面積呈良好的線性關(guān)系（見表3）。

2.4.2方法的準(zhǔn)確度和精密度

添加回收試驗(yàn)結(jié)果表明（見表4）：在0.05、0.1、1mg/kg3個(gè)質(zhì)量分?jǐn)?shù)添加水平下，二氯喹啉酸在水稻3種基質(zhì)中的日內(nèi)平均回收率為83%～96%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSDs）（n=5）為0.4%～8.7%；日間平均回收率為85%～94%,RSDs（n=15）為0.7%～4.7%。在0.01、0.1、1mg/kg3個(gè)質(zhì)量分?jǐn)?shù)添加水平下，二氯喹啉酸甲酯在水稻中的日內(nèi)平均回收率為79%～106%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSDs）（n=5）為0.2%～12.5%；日間平均回收率為87%～96%,RSDs（n=15）為2.5%～14.4%。數(shù)據(jù)表明該分析方法的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性滿足農(nóng)藥殘留分析的要求。

2.5實(shí)際樣品的分析

通過1年12地50%二氯喹啉酸可溶粉劑在移栽水稻田農(nóng)藥殘留試驗(yàn)，采集水稻樣品作為檢測(cè)對(duì)象，應(yīng)用本試驗(yàn)建立的方法，測(cè)定12地樣品中二氯喹啉酸及其代謝物的殘留量情況。結(jié)果表明（見表5）:12地水稻樣品中二氯喹啉酸的殘留量為0.05～0.48mg/kg，二氯喹啉酸甲酯的殘留量均小于0.01mg/kg。二氯喹啉酸及其代謝物二氯喹啉酸甲酯在水稻中的殘留量之和小于中國制定二氯喹啉酸在水稻中的最大殘留限量（1mg/kg）。

3結(jié)論與討論

建立了QuEChERS前處理方法結(jié)合高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定水稻中二氯喹啉酸及其代謝物二氯喹啉酸甲酯的殘留檢測(cè)方法，試驗(yàn)操作簡(jiǎn)單、快捷、靈敏度高，可用于大量樣品的快速檢測(cè)。通過選擇不同提取劑，優(yōu)化分散固相萃取劑的添加量實(shí)現(xiàn)水稻3種基質(zhì)的高效提取，方法的平均回收率為79%～106%,RSD為0.2%～14.4%，可滿足二氯喹啉酸和二氯喹啉酸甲酯殘留檢測(cè)的要求。

同時(shí)本方法用于1年12地水稻樣品中二氯喹啉酸和二氯喹啉酸甲酯的殘留分析，結(jié)果顯示二氯喹啉酸的殘留量為0.05～0.48mg/kg，二氯喹啉酸甲酯的殘留量均小于0.01mg/kg，低于國家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的二氯喹啉酸在水稻上的最大殘留限量（1mg/kg）。試驗(yàn)選取的12個(gè)地區(qū)分屬我國不同的水稻產(chǎn)區(qū)，研究表明，東北水稻產(chǎn)區(qū)（黑龍江和遼寧）的樣品中二氯喹啉酸的殘留量要高于其他地區(qū)，因東北地區(qū)水稻生育期較其他地區(qū)長(zhǎng)，多種植晚熟品種[26]，推測(cè)二氯喹啉酸在水稻中殘留與不同地區(qū)氣候條件和種植品種有關(guān)。

對(duì)于水稻的不同部分（糙米、稻殼和稻稈），二氯喹啉酸在稻殼中的分布較廣，糙米和稻稈中分布較少，因此稻谷經(jīng)過脫殼可以有效減少二氯喹啉酸的殘留。

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