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2結果與分析
2.1醬油發(fā)酵過程中嗜鹽四聯(lián)球菌和酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化
模擬低鹽醬油快速發(fā)酵過程中,魯氏接合酵母和嗜鹽四聯(lián)球菌數(shù)量的動態(tài)變化見圖1。由圖1可知,嗜鹽四聯(lián)球菌在第10天添加后,數(shù)量呈先降低后增加的趨勢,發(fā)酵中后期可保持在105~106CFU/g。單獨添加魯氏接合酵母,醬醪中魯氏接合酵母的數(shù)量在發(fā)酵0~14d有少量減少,發(fā)酵15d后開始生長并在第30天達到4.7×106CFU/g。嗜鹽四聯(lián)球菌的添加對魯氏接合酵母的生長有一定的影響,使醬醪中酵母的數(shù)量降低了2.8~3.0個數(shù)量級。這種現(xiàn)象可能是因為它們的增值速率不同,且存在對營養(yǎng)物質(zhì)的相互競爭,也可能受到各自代謝產(chǎn)物的抑制等。例如乳酸菌產(chǎn)生的乙酸、苯乳酸、環(huán)肽等化合物都能抑制酵母的生長。只添加魯氏接合酵母的醬醪中,也檢測到了嗜鹽四聯(lián)球菌(3×103~9×103CFU/g),這可能是醬醪體系中含有的嗜鹽四聯(lián)球菌。
2.2醬油發(fā)酵過程中醬醪理化指標的動態(tài)變化
對醬油發(fā)酵過程中醬醪的基本理化指標(pH、總酸、還原糖和氨基酸態(tài)氮含量)進行測定,結果見圖2。
由圖2可知,醬油發(fā)酵前5d,醬醪的pH值及還原糖含量急劇下降,發(fā)酵5d后,pH值略微上升,還原糖含量趨于穩(wěn)定。添加嗜鹽四聯(lián)球菌后使醬醪pH值略有下降,發(fā)酵終點時醬醪pH值約為4.6~4.9;還原糖含量略有升高。醬油發(fā)酵過程中,醬醪中總酸、氨基酸態(tài)氮含量均呈現(xiàn)上升趨勢,且添加嗜鹽四聯(lián)球菌后,醬醪中總酸和氨基酸態(tài)氮含量顯著增加(P<0.01)。在考察的4種添加方式中,發(fā)酵開始添加魯氏接合酵母并在10d添加106CFU/g嗜鹽四聯(lián)球菌的醬醪樣品中總酸和氨基酸態(tài)氮含量最高,發(fā)酵30d后分別比只添加魯氏接合酵母的樣品提高了22.5%和30.2%。
2.3嗜鹽四聯(lián)球菌添加對醬油中氨基酸含量的影響
嗜鹽四聯(lián)球菌是耐鹽乳酸菌,已有研究證實醬醪來源的嗜鹽四聯(lián)球菌具有多種寡肽酶活性。因此,在醬油發(fā)酵過程中強化嗜鹽四聯(lián)球菌可能會增加醬油中游離氨基酸的含量。采用HPLC對模擬低鹽醬油快速發(fā)酵不同時期醬醪中16種氨基酸進行定量分析,結果見圖3,模擬低鹽快速發(fā)酵醬油樣品中呈味氨基酸含量變化見圖4。
由圖3可知,添加嗜鹽四聯(lián)球菌能顯著提高游離氨基酸含量(P<0.01)。發(fā)酵終點時,發(fā)酵開始添加魯氏接合酵母并在10d添加108CFU/g嗜鹽四聯(lián)球菌的醬醪中氨基酸總量最高,達到28.7g/L,比只添加魯氏接合酵母的醬醪樣品(19.9g/L)高43.8%。為進一步分析嗜鹽四聯(lián)球菌對醬油中游離氨基酸的貢獻,比較了強化嗜鹽四聯(lián)球菌對醬油中鮮味氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸)和甜味氨基酸(甘氨酸、蘇氨酸、丙氨酸和絲氨酸)含量的影響。由圖4可知,添加嗜鹽四聯(lián)球菌使醬油中鮮味氨基酸和甜味氨基酸的含量顯著增加(P<0.01)。其中發(fā)酵開始添加魯氏接合酵母并在10d添加108CFU/g嗜鹽四聯(lián)球菌發(fā)酵的醬油中鮮味和甜味氨基酸含量最高,分別達到8.5g/L和4.9g/L,比只添加魯氏接合酵母的醬油樣品(6.3g/L和3.8g/L)分別高33.7%和29.8%。
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