葉黃素是許多生物體內(nèi)合成的有色類異戊二烯代謝物，與玉米黃質(zhì)一起形成黃斑色素，具有藍光過濾和抗氧化的特性。從實驗動物的飲食中去除葉黃素會導致視網(wǎng)膜的早期退化跡象，而患有后天性黃斑色素喪失（黃斑毛細血管擴張癥）的患者表現(xiàn)出嚴重的視力障礙，表明黃斑色素的重要性。葉黃素還與年齡相關(guān)性黃斑變性（AMD）和白內(nèi)障的風險有關(guān)。葉黃素有助于淬滅復雜生理反應產(chǎn)生的自由基，從而保護眼睛免受氧化應激、細胞凋亡、線粒體功能障礙和炎癥的影響。葉黃素可能有助于降低某些類型癌癥的風險，特別是乳腺癌和肺癌以及多囊卵巢綜合癥。研究表明葉黃素對MCF-7乳腺癌細胞的增殖有抑制作用，并能誘導乳腺癌細胞凋亡，葉黃素通過阻斷脂肪細胞分化的早期調(diào)節(jié)因子從而抑制脂肪生成，還可通過提高NO水平、降低MDA含量和CaN活性等抗氧化、阻止鈣離子通道的作用，從而抑制膠原的合成，抑制大鼠MF，對心肌起到一定的保護作用。研究表明葉黃素還可能對大腦的發(fā)育和功能有貢獻。

多環(huán)芳烴（polycyclicaromatichydrocarbons，PAHs）及其取代基存在于所有水源中。含有PAHs的高水平混合污染物的暴露會導致眼部刺激、惡心、嘔吐和腹瀉等癥狀。許多PAHs及其環(huán)氧化合物對微生物以及包括人類在內(nèi)的高級生命形式具有劇毒、誘變或致癌作用。PAHs可在栽培過程中從空氣和土壤中轉(zhuǎn)移到植株，萬壽菊在種植、采收、運輸、加工等過程中易受到PAHs的污染進而在葉黃素產(chǎn)品中檢測到。由于多環(huán)芳烴存在多種形式，歐盟委員會（EC）制定了苯并（α）芘（benzopyrene，BaP）、苯并［b］熒蒽（Benzo［b］fluorathene，B［b］F）、苯并［a］蒽（Benz［a］anthracene，BaA）、屈（chrysene，CHR）作為四種關(guān)鍵的多環(huán)芳烴標記物（以下簡稱PAH4）的安全水平要求（No.18812006）：油脂中BaP要求小于2μg/kg，四種多環(huán)芳烴總量要求小于10μg/kg。其中BaP具有強烈的致癌性，B［b］F具有細胞毒性，BaA可引起細胞損傷和肝臟疾病，當兩種或幾種同時暴露于人體時毒性更強。

鄰苯二甲酸二丁酯（di-butylphthalate，DBP）和鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（di-2-ethylhexylphthalate，DEHP）是塑料生產(chǎn)過程中使用的主要鄰苯二甲酸酯，它們已成為導致嚴重環(huán)境問題的污染物。DBP和DEHP可擾亂整個胎盤的內(nèi)分泌和免疫功能，導致胎膜早破，胎盤早剝，先兆子癇和早產(chǎn)等。研究表明DBP和DEHP在成熟小麥組織中的積累和代謝及其對籽粒解毒和抗氧化系統(tǒng)有影響，可從土壤進入籽粒而誘導活性氧的產(chǎn)生，并上調(diào)抗氧化酶（細胞色素P4503A4和過氧化物酶）的表達和活性。李曉貝等對四種蔬菜中DBP和DEHP及其代謝物的吸收累積進行了研究，結(jié)果表明，土壤中的DBP、DEHP能被蔬菜產(chǎn)品吸收富集，并且在體內(nèi)代謝出毒性比母體更高的單酯產(chǎn)物。衛(wèi)生部辦公廳2011年發(fā)布的衛(wèi)辦監(jiān)督函（2011）551號中規(guī)定：食品、食品添加劑中的鄰苯二甲酸二（a-乙基已脂）（DEHP）、鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP）和鄰苯二甲酸二正丁酯（DBP）最大殘留量分別為1.5mg/kg、9.0mg/kg和0.3mg/kg。歐盟對以上塑化劑要求與中國相同。DINP因限值較高且鮮見超標報道，本研究不做檢測。

本研究通過對葉黃素生產(chǎn)加工過程跟蹤取樣，從原料萬壽菊鮮花至葉黃素浸膏至成品葉黃素晶體和低含量葉黃素完全對應，通過樣品數(shù)據(jù)結(jié)果分析PAH4和塑化劑DBP、DEHP在葉黃素生產(chǎn)加工過程中的遷移量及遷移規(guī)律，以期為葉黃素提取過程中典型多環(huán)芳烴和塑化劑的管控提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

本研究所用萬壽菊鮮花及葉黃素相關(guān)產(chǎn)品均由晨光生物科技集團股份有限公司提供。

乙腈、正己烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷，色譜純，美國ThermoFisher公司；丙酮，色譜純級：上海星可高純?nèi)軇┯邢薰?；超純水，自制；GPC流動相：環(huán)己烷：乙酸乙酯=1∶1（體積比）；BaP標準品：德國Dr.Ehrenstorfer公司；DBP、DEHP標準品：天津一方科技有限公司。

1.2 儀器與設備

LC-20AT高效液相色譜儀（HPLC）配RF-20Axs熒光檢測器、AUY220型分析天平：日本島津；Agilent7890B-7000D氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）：安捷倫科技有限公司；QSC-12T氮吹儀：上海泉島科貿(mào)有限公司；PreplincGPC凝膠凈化色譜：美國J2Scientific公司；Master-SUVF超純水機：上海和泰儀器有限公司；H-2050R高速冷凍離心機：湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司；R201L旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：上海申生科技有限公司；XW-80A渦旋混合器：濟南精密科學儀器儀表有限公司；TH-600型超聲波清洗器：濟寧天華超聲電子儀器有限公司；固相萃?。⊿PE）裝置，固相萃取柱：PSA/Silica復合填料玻璃柱（1000mg，6mL）：AgelaTechnologies。

1.3 檢測方法

PAH4檢測方法按吉桂珍等《5種天然植物提取物中4種多環(huán)芳烴的HPLC-FLR測定方法》進行檢測。DBP、DEHP按國標GB5009.271-2016《食品安全國家標準食品中鄰苯二甲酸酯的測定》進行檢測。

1.4 遷移率計算

分別計算出萬壽菊至鮮花顆粒、鮮花顆粒至渣子及葉黃素浸膏、葉黃素浸膏至葉黃素晶體及低含量葉黃素的重量得率，再由重量得率及各階段產(chǎn)品典型多環(huán)芳烴和塑化劑的單位含量得到遷移總量，并計算出遷移率。

相關(guān)鏈接：鄰苯二甲酸二丁酯，葉黃素，乙酸乙酯，鄰苯二甲酸二異壬酯

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