北方偉業(yè)計量集團有限公司
刺五加（Acanthopanaxsenticosus），別名：坎拐棒子、老虎潦、一百針。屬傘形目五加科，多生于山坡林中及路旁灌叢中，分布于中國東北、華北地區(qū)，刺五加的根及根莖炮制后可入藥，后經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)其莖和葉亦可用于藥用。刺五加富含多糖、黃酮以及多種苷類。研究者通過研究發(fā)現(xiàn)，刺五加能夠增強人體免疫力，提高思維能力，并具有抗腫瘤、抗疲勞、抗衰老、抗心血管疾病、增強免疫功能等生物學(xué)活性和藥用價值。刺五加在中國醫(yī)藥學(xué)中做為藥物廣泛應(yīng)用已有悠久的歷史，南北朝劉宋·雷敩著《炮炙論》記五加皮有“陽人使陰，陰人使陽”的作用。國外對人參及其近緣植物刺五加進行了較系統(tǒng)的研究，證明了刺五加和人參有相似的藥理作用和臨床療效。果汁既具有果實獨特的風(fēng)味，又極富營養(yǎng)價值，其制備方式包括壓榨法、酶解法、離心法、超聲波輔助提取法等，酶解法利用生物酶的活性分解果實的細胞壁、細胞膜等結(jié)構(gòu)，降解其纖維素及果膠等物質(zhì)，此方法彌補了傳統(tǒng)工藝受限于果實的組織及細胞結(jié)構(gòu)來提取黃酮、多酚等營養(yǎng)物質(zhì)并提高其出汁率。黃峰華等等對比了酶解法與非酶解法小蘋果果汁的出汁率，酶解法其出汁率提高了40.7%；李德燕等等對比了酥李果汁果膠酶處理與未經(jīng)酶處理，其出汁率提高27.13%，纖維素酶較未經(jīng)酶處理提高20.18%。
隨著酶解法的廣泛應(yīng)用，多種植物果汁酶解提取工藝已應(yīng)用于實踐生產(chǎn)。隨著中藥現(xiàn)代化進程的不斷發(fā)展，以刺五加為原料的中成藥種類繁多，如刺五加膠囊、刺五加黃酮滴丸等，而提高其產(chǎn)量及生物活性研究至關(guān)重要，故本試驗以酶的種類、料液比、酶解時間、酶解溫度和酶的添加量為研究對象，研究各因素對刺五加果實出汁率的影響，并對刺五加果實酶解工藝進行優(yōu)化，以期提高其出汁率，為我國刺五加果實的精深加工提供參考。
刺五加干果，購于黑龍江省尚志市葦河鎮(zhèn)。PectinexXXL果膠酶、纖維素酶、木聚糖酶、植物水解酶，酶活均為10000U/mL：諾維信（中國）生物技術(shù)有限公司。
EX324型電子天平：奧豪斯儀器（上海）有限公司；HWS24型電熱恒溫水浴鍋：上海一恒科技有限公司；Eppendorfminispan離心機：德國Eppendorf公司；UV-1100紫外-可見分光光度計：上海凌析達儀器。
刺五加果實→稱重→加水→破碎成漿→加酶→保溫酶解→離心→上清液→刺五加汁
準確稱取一定量飽滿完好的刺五加干果，按照設(shè)定的液料比加入蒸餾水，密封浸泡使其充分吸水軟化，用研缽將刺五加果實充分研磨成漿。按照設(shè)定的酶添加量，向刺五加果實漿中加入不同種類酶，按照設(shè)定條件進行酶解處理，在酶解后，經(jīng)95℃滅酶10min，將酶解液置于離心機中10000r/min離心10min取上清液，得到刺五加果汁。
（1）酶的種類對刺五加果實出汁率的影響。當酶添加總量為3‰，酶解溫度為50℃，酶解時間為3h，液料比為18:1mL/g時，考察了酶的種類（不添加酶，添加纖維素酶，添加果膠酶，添加纖維素酶和果膠酶，添加纖維素酶和木聚糖酶，添加植物水解酶）對刺五加果實出汁率的影響。
（2）酶添加量對刺五加果實出汁率的影響。當添加酶種類為果膠酶，酶解溫度為50℃，酶解時間為3h，液料比為18:1mL/g時，考察了酶添加量（1‰、2‰、3‰、4‰、5‰）對刺五加果實出汁率的影響。
（3）料液比對刺五加果實出汁率的影響。當添加酶種類為果膠酶，酶添加量為3‰，酶解溫度為50℃，酶解時間為3h時，考察液料比（12:1、14:1、16:1、18:1、20:1mL/g）對刺五加果實出汁率的影響。
（4）酶解溫度對刺五加果實出汁率的影響。當添加酶種類為果膠酶，酶添加量為3‰，酶解時間為3h，液料比為18:1mL/g時，考察酶解溫度（40℃、45℃、50℃、55℃、60℃）對刺五加果實出汁率的影響。
（5）酶解時間對刺五加果實出汁率的影響。當添加酶種類為果膠酶，酶添加量為3‰，酶解溫度為50℃，液料比為18:1mL/g時，考察酶解時間（1.5h、2.0h、2.5h、3.0h、3.5h、4.0h）對刺五加果實出汁率的影響。
在單因素試驗的基礎(chǔ)上，依據(jù)Box-Behnken設(shè)計原理，以刺五加果實出汁率為響應(yīng)值，選取酶的添加量、液料比、酶解溫度、酶解時間設(shè)計響應(yīng)曲面試驗，優(yōu)化刺五加果汁制作的工藝參數(shù)，試驗因素及水平見表1。
分別稱取刺五加果漿及離心過濾后上清液的質(zhì)量，按照如下公式計算出汁率：
出汁率=上清液質(zhì)量/刺五加果漿質(zhì)量×100%
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本文采用提取蛋白和油脂后的金槍魚蒸煮液為原料，以感官評定、氨基酸態(tài)氮含量為測定指標，同時輔以電子鼻分析發(fā)酵液的氣味變化，對酵母發(fā)酵制備海鮮調(diào)味品基料進行評定。通過單因素實驗研究酵母種類、酵母添加量、發(fā)酵時間、鹽度對發(fā)酵產(chǎn)物的影響，在此基礎(chǔ)上通過響應(yīng)面設(shè)計進一步確定最佳發(fā)酵工藝。
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本文采用提取蛋白和油脂后的金槍魚蒸煮液為原料，以感官評定、氨基酸態(tài)氮含量為測定指標，同時輔以電子鼻分析發(fā)酵液的氣味變化，對酵母發(fā)酵制備海鮮調(diào)味品基料進行評定。通過單因素實驗研究酵母種類、酵母添加量、發(fā)酵時間、鹽度對發(fā)酵產(chǎn)物的影響，在此基礎(chǔ)上通過響應(yīng)面設(shè)計進一步確定最佳發(fā)酵工藝。
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優(yōu)選白芷揮發(fā)油最佳提取工藝，并對其抗氧化活性進行研究。采用Box-Behnken設(shè)計響應(yīng)面法，考察液料比、浸泡時間、提取時間及粉碎粒度4個因素對白芷揮發(fā)油得率的影響，分別采用多元線性方程及二項式方程擬合實驗結(jié)果，確定優(yōu)化組合條件。最佳提取工藝為：粉碎粒度為65目，液料比為20∶1（mL/g），浸泡時間為2.3h，提取時間為5.4h，在此條件下?lián)]發(fā)油得率為2.273%。對羥自由基的IC50為0.882mg/mL，對DDPH自由基的IC50為0.722mg/mL。
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優(yōu)選白芷揮發(fā)油最佳提取工藝，并對其抗氧化活性進行研究。采用Box-Behnken設(shè)計響應(yīng)面法，考察液料比、浸泡時間、提取時間及粉碎粒度4個因素對白芷揮發(fā)油得率的影響，分別采用多元線性方程及二項式方程擬合實驗結(jié)果，確定優(yōu)化組合條件。最佳提取工藝為：粉碎粒度為65目，液料比為20∶1（mL/g），浸泡時間為2.3h，提取時間為5.4h，在此條件下?lián)]發(fā)油得率為2.273%。對羥自由基的IC50為0.882mg/mL，對DDPH自由基的IC50為0.722mg/mL。
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優(yōu)選白芷揮發(fā)油最佳提取工藝，并對其抗氧化活性進行研究。采用Box-Behnken設(shè)計響應(yīng)面法，考察液料比、浸泡時間、提取時間及粉碎粒度4個因素對白芷揮發(fā)油得率的影響，分別采用多元線性方程及二項式方程擬合實驗結(jié)果，確定優(yōu)化組合條件。最佳提取工藝為：粉碎粒度為65目，液料比為20∶1（mL/g），浸泡時間為2.3h，提取時間為5.4h，在此條件下?lián)]發(fā)油得率為2.273%。對羥自由基的IC50為0.882mg/mL，對DDPH自由基的IC50為0.722mg/mL。
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