2.4 肉桂醛縮氨基脲對XOD抑制常數(shù)

以黃嘌呤為底物，研究了肉桂醛縮氨基脲對黃嘌呤氧化酶活性的抑制常數(shù)。改變加入黃嘌呤的濃度，加入0.1mL酶活為0.2U/mL的黃嘌呤氧化酶，加入肉桂醛縮氨基脲使體系內(nèi)終濃度分別為O、30、40、60μmol/L，測定不同濃度肉桂醛縮氨基脲對酶活性的影響。抑制類型由Lineweaver-Burk雙倒數(shù)作圖法來判斷。縱坐標是反應速率的倒數(shù)，橫坐標是底物濃度的倒數(shù)，作圖，試驗結果見圖4(a)，顯示一組直線相交于第二象限，推測出肉桂醛縮氨基脲不僅能夠與酶底物復合物結合，還能與游離酶結合，說明肉桂醛縮氨基脲抑制黃嘌呤氧化酶活性的類型為混合型抑制作用?？v坐標是直線斜率，橫坐標是肉桂醛縮氨基脲濃度，作圖，可以計算出肉桂醛縮氨基脲的抑制常數(shù)K1，即抑制劑與酶的親和能力(見圖4(b))?？v坐標是Y軸截距，橫坐標是肉桂醛縮氨基脲濃度，作圖，可以計算出肉桂醛縮氨基脲的抑制常數(shù)KIS，即抑制劑對酶底物復合物的親和能力(見圖4(c))。試驗結果顯示，肉桂醛縮氨基脲抑制黃嘌呤氧化酶活性的類型為混合型可逆抑制，抑制常數(shù)K_I為27.25μmol/L，K_IS為50.30μmol/L。

2.5 肉桂醛縮氨基脲對小鼠血尿酸質(zhì)量濃度、血清XOD和肝臟XOD活性的影響

由圖5可知，模型組與正常對照組相比，造模后小鼠的血尿酸質(zhì)量濃度顯著升高(p＜0.05，n=10)，表明造模成功。與模型組小鼠相比，肉桂醛縮氨基脲組小鼠的血尿酸質(zhì)量濃度降低，差異顯著(P＜0.05，n=10)。活性順序是：別嘌呤醇＞肉桂醛縮氨基脲＞肉桂醛。

由圖6可知，模型組與正常對照組相比，造模后小鼠血清XOD活性顯著升高(p＜0.05，n=10)，表明造模成功。與模型組小鼠相比，肉桂醛縮氨基脲組小鼠血清XOD活性降低，差異顯著(P＜0.05，n=10)?；钚皂樞蚴牵簞e嘌呤醇＞肉桂醛縮氨基脲＞肉桂醛。

由圖7可知，模型組與正常對照組相比，造模后小鼠肝臟的XOD活性顯著升高(p＜0.05，n=10)，表明造模成功。與模型組小鼠相比，肉桂醛縮氨基脲組小鼠的肝臟的XOD活性降低。差異顯著(P＜O.05，n=10)?；钚皂樞蚴牵簞e嘌呤醇＞肉桂醛縮氨基脲＞肉桂醛。
 

3 結語

作者研究了肉桂醛縮氨基脲對黃嘌呤氧化酶的抑制作用。合成、表征了肉桂醛縮氨基脲，以黃嘌呤為底物，測定了肉桂醛縮氨基脲對黃嘌呤氧化酶活性的IC₅₀、抑制類型和抑制常數(shù)。研究了肉桂醛縮氨基脲對小鼠血尿酸質(zhì)量濃度、血清XOD活性和肝臟XOD活性的影響。肉桂醛縮氨基脲對黃嘌呤氧化酶活性抑制效果顯著，IC₅₀為55.48μmol/L，是混合型可逆抑制，抑制常數(shù)K_I為27.25μmo兒，K_IS為50.30μmol/L。與模型組相比，肉桂醛縮氨基脲能顯著降低小鼠血尿酸質(zhì)量濃度、血清XOD活性和肝臟XOD活性，差異顯著(P＜0.05，n=10)?；钚皂樞颍簞e嘌呤醇＞肉桂醛縮氨基脲＞肉桂醛。總之，肉桂醛縮氨基脲對黃嘌呤氧化酶活性抑制效果顯著，能顯著降低小鼠血尿酸質(zhì)量濃度、血清XOD活性和肝臟XOD活性，是降低尿酸、防治痛風的候選藥物。

相關鏈接：黃嘌呤，肉桂醛，尿酸，氧化酶

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