2.5 BLG-膠體粒子體系黏度測(cè)定

如圖5所示，在膠體粒子A分散的BLG蛋白溶液體系中，BLG溶液黏度隨蛋白濃度提高有極小上升趨勢(shì)，可能是由于分子間的引力沒(méi)有明顯變化。而B(niǎo)與C膠體粒子分散的體系中，在蛋白濃度較低時(shí)黏度趨勢(shì)不變，而隨著蛋白濃度進(jìn)一步提高，蛋白表觀黏度也有微小上升趨勢(shì)，可能是由于蛋白溶液分子內(nèi)的氫鍵作用增強(qiáng)從而引起黏度的增加。用宏觀流變的方法測(cè)得溶液的黏度如表4所示。通過(guò)比較宏觀與微觀的黏度值，發(fā)現(xiàn)膠體粒子C分散的溶液黏度與宏觀測(cè)得的黏度差距最小，說(shuō)明動(dòng)態(tài)光散射利用膠體粒子所測(cè)得的黏度是真實(shí)有效的，其中膠體粒子C與BLG相互作用最弱，膠體粒子C更適宜微觀測(cè)黏度。

2.6 BSA-膠體粒子體系黏度測(cè)定

圖6顯示隨著蛋白濃度的提高，蛋白溶液黏度有所波動(dòng)。膠體粒子B分散的體系中，隨蛋白濃度的提高，蛋白溶液黏度有輕微上升趨勢(shì)。膠體粒子C分散的體系中，同BLG一樣，在較低濃度時(shí)蛋白溶液黏度沒(méi)有隨蛋白濃度提高而發(fā)生明顯變化，而在蛋白濃度較高時(shí)，蛋白溶液黏度有輕微上升趨勢(shì)。如表5所示，結(jié)合宏觀測(cè)得的黏度進(jìn)行顯著性分析，可以看出pH7.4條件下，膠體粒子A，B，C均適宜測(cè)量BSA溶液黏度。

2.7 OVA-膠體粒子體系黏度測(cè)定

如圖7所示，隨著濃度的提高，OVA溶液黏度有所波動(dòng)，整體趨于穩(wěn)定，可能是由于蛋白濃度過(guò)低，蛋白分子間的氫鍵作用較弱導(dǎo)致黏度沒(méi)有顯著變化。結(jié)合表6，膠體粒子B微觀測(cè)得的黏度與宏觀無(wú)顯著性差異。因此，通過(guò)DLS選擇合適的膠體粒子微觀測(cè)得的黏度值可以信賴。可能對(duì)微觀測(cè)量結(jié)果造成偏差的主要原因有：1）顆粒團(tuán)聚，本研究在試驗(yàn)前均將分散體系充分搖晃，但即便如此，也無(wú)法保證顆粒在分散體系中不會(huì)出現(xiàn)顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象。2）顆粒在待測(cè)液體樣品中可能存在分布不均勻的情況，局部顆粒濃度過(guò)高可能會(huì)導(dǎo)致多重散射的現(xiàn)象。

3 結(jié)論

本文利用光散射技術(shù)監(jiān)測(cè)蛋白-膠體粒子體系的相互作用，優(yōu)化了一種有效的微觀測(cè)定溶液黏度的方法，增加了研究蛋白分子構(gòu)象及溶液性質(zhì)的另一個(gè)維度。結(jié)果表明，膠體粒子的粒徑和蛋白濃度均對(duì)粒子間的相互作用影響較小，而膠體粒子與蛋白質(zhì)表面帶電性質(zhì)卻顯著影響分子間的相互作用，且對(duì)體系黏度測(cè)定也有較大影響。因此利用黏度測(cè)定的方法監(jiān)測(cè)分子間的相互作用是可行的。此外，比較宏觀與微觀測(cè)得的黏度值，發(fā)現(xiàn)表面接有羧基的膠體粒子在測(cè)量溶液黏度時(shí)適用性較高。這也說(shuō)明了DLS微觀測(cè)得的黏度值是真實(shí)有效的，且DLS測(cè)量蛋白溶液黏度具有顯著的優(yōu)勢(shì)。

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