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對比不同處理時間點發(fā)現(xiàn)，胞內(nèi)H202濃度呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢；與對照組0μmol/L相比，H202濃度lh內(nèi)出現(xiàn)了短暫增高，其中80μmol/L組極顯著增高(P＜0.001)(圖6a)，處理3h后，與對照組相比高濃度EGCG中的H202濃度出現(xiàn)顯著下降(P＜0.05)(圖6c)，這種現(xiàn)象在處理12h后更顯著(P＜0.001)(圖6d)。
結(jié)果顯示，隨著處理時間的延長，培養(yǎng)體系中H202濃度呈現(xiàn)上升趨勢；對比相同時間不同濃度組發(fā)現(xiàn)，處理2、3、6、12h后，20、40、80μmol/L的處理體系H202濃度顯著高于對照組(P＜0.05)，即培養(yǎng)體系巾的H202濃度隨時問延長和EGCG濃度的增加而顯著上升，處理24h后胞外的H202水平出現(xiàn)明顯降低，見圖7。
EGCG的多種生物活性已在細胞培養(yǎng)模型中得到證實，其中最顯著的為抗氧化、抗炎和抗癌作用，這表明EGCG很可能成為因ROS增加和/或細胞抗氧化能力不足引發(fā)的退行性疾病的臨床藥物。然而，EGCG在相應動物實驗中的結(jié)果是存在爭議的。依據(jù)EGCG結(jié)構特征，其在細胞培養(yǎng)物中和整個生物體中的活性不一致可能歸因于EGCG分子的穩(wěn)定性不足，EGCG不受控的降解或聚合，不僅會導致體外研究結(jié)論不準確，還會限制EGCG在體內(nèi)的生物利用度。
本實驗發(fā)現(xiàn)不同的溶液環(huán)境對EGCG的氧化聚合有較明顯影響，在DMEM培養(yǎng)液中EGCG的聚合效率更高，而H2O的影響較小，這與Krupkova等的研究結(jié)果吻合；高溫促進了EGCG的自動氧化，Krupkova等也證實低溫可以保持EGCG的穩(wěn)定性；不同EGCG濃度下EGCG的氧化聚合程度不同，高濃度促進EGCG的聚合，同時，隨著反應時問的增長，EGCG的聚合物增多；溶液pH對EGCG的穩(wěn)定性也有較明顯影響，EGCG在酸性環(huán)境中更加穩(wěn)定(pH＜6)，這與相關研究相符。由此可見，溶液環(huán)境、溫度、反應時問、EGCG濃度和溶液pH等因素均會影響EGCG的穩(wěn)定性，在相關實驗條件下應給予考慮。已有研究證實，環(huán)境是確定EGCG抗淀粉樣蛋白功效的關鍵因素，因此，解析EGCG穩(wěn)定性的環(huán)境條件對于進一步研究其在機體中發(fā)揮功效的機制有重要意義。
在正常培養(yǎng)細胞體系巾探討了EGCG的穩(wěn)定性對其抗氧化能力的影響，發(fā)現(xiàn)胞外H202水平在時間和濃度效應上與對照組相比呈上升趨勢，而胞內(nèi)出現(xiàn)先上升后下降的趨勢。研究分析，EGCG在培養(yǎng)體系中會發(fā)現(xiàn)氧化聚合反應，生成H202；隨后，H202進入細胞，使胞內(nèi)H202水平迅速上升，給細胞造成氧化脅迫，激活胞內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)應對脅迫，隨著抗氧化酶系的積極響應，胞內(nèi)H202水平出現(xiàn)短暫上升然后開始下降，最終表現(xiàn)為EGCG處理后，細胞內(nèi)H202濃度低于未處理細胞，表現(xiàn)為抗氧化效應，特別是20μmol/L組，這一過程可能是EGCG發(fā)揮生物活性，特別是在抗增殖和癌癥治療中的潛在作用。如20μmol/L的EGCG是其通過預警響應發(fā)揮抗氧化活性的最適濃度，隨著EGCG濃度的升高，氧化聚合反應產(chǎn)生的H202水平超過細胞氧化應激范圍，可能對細胞造成氧化損傷，詳細分子機制有待進一步驗證。
RPMI1640和DMEM培養(yǎng)基較H202更促進EGCG的氧化聚合，低溫低EGCG濃度及酸性條件利于EGCG的穩(wěn)定，同時EGCG的氧化聚合隨反應時間延長而加劇。存含有細胞的培養(yǎng)體系中，EGCG也會發(fā)生自動氧化聚合并產(chǎn)生H202，導致細胞內(nèi)外的H202濃度升高，但胞內(nèi)H202濃度呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。研究結(jié)果提示，一定濃度的EGCG在培養(yǎng)細胞中可能通過氧化聚合產(chǎn)生H202，形成氧化脅迫，進而激活細胞內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)，使細胞內(nèi)H202濃度隨后降低，表現(xiàn)出抗氧化效應。
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建立高效液相色譜法同時測定白茶中6種茶多酚類物質(zhì)含量的方法。采用AgilentC18（250mm×4.6mm，5.0μm）色譜柱，流動相：A：0.3%甲酸水溶液；B：0.3%甲酸甲醇溶液；柱溫：40℃；流速：1mL/min；檢測波長：280nm；進樣量：2μL；梯度程序：0min（85%A+15%B），60min（70%A+30%B）。利用響應面法優(yōu)化茶葉中茶多酚提取工藝，采用高效液相色譜法同時測定不同茶葉中6種茶多酚活性成分，此方法可用來進行不同種類茶葉中茶多酚提取及定量分析研究。
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為了對不同品牌不同產(chǎn)地的無糖綠茶飲料中滋味物質(zhì)進行品評，從市場上收集了3個產(chǎn)地9個品牌的13種不同的綠茶飲料。對其茶多酚類物質(zhì)、氨基酸類物質(zhì)、咖啡因、可溶性固形物、pH以及感官評價進行分析研究。結(jié)果表明：不同的綠茶產(chǎn)品在主要滋味物質(zhì)、pH以及感官評分方面均存在顯著差異，且同一品牌不同產(chǎn)地的綠茶飲料在感官評分上也存在差異。這13個不同的綠茶飲料其茶多酚質(zhì)量濃度符合國家標準的有11個，咖啡因質(zhì)量濃度符合國家標準的有12個。
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