北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
由于微生物具有生命活性，當(dāng)其儲存在室溫下將因繁殖而數(shù)量不斷增加，然而當(dāng)其儲存在冷凍狀態(tài)下又容易因形成冰晶體產(chǎn)生機(jī)械性切割效應(yīng)使得細(xì)胞發(fā)生破裂而死亡。因此，微生物的測量量值很難在不同實(shí)驗(yàn)室之間復(fù)現(xiàn)。如何制備生命活性穩(wěn)定且能均勻分布的微生物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，是長期困擾各國科研工作者的關(guān)鍵難題。
中國計(jì)量科學(xué)研究院通過多年的探索，研究建立了一套微生物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備方法。首先，將微生物培養(yǎng)到對數(shù)生長期，使其生理狀態(tài)達(dá)到一致；然后，采用PB(Plackett-Burman）和響應(yīng)面等實(shí)驗(yàn)從上百種試劑中篩選發(fā)明出能有效保持微生物活性穩(wěn)定的保護(hù)劑配方；最后，通過冷凍干燥技術(shù)將微生物制備成休眠狀態(tài)，從而實(shí)現(xiàn)了微生物量值在不同時間和不同空間的復(fù)現(xiàn)?；谧灾髦R產(chǎn)權(quán)的微生物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備方法，中國計(jì)量科學(xué)研究院已經(jīng)成功研制并申報了國家一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)3種和國家二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)15種，主要包括大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、枯草芽孢桿菌等（見表2），初步滿足了我國在食品安全檢測、生物安全防護(hù)性能評價、微生物制藥和儀器校準(zhǔn)等領(lǐng)域微生物的測量需求，使我國成為繼歐盟委員會聯(lián)合研究中心標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與測量研究院（JRC-IRMM）、英國國家生物制品檢定所（NIBSC）和美國標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究院（NIST）之后世界上少數(shù)幾個掌握了微生物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備技術(shù)的國家。
致病微生物污染是全球性的食品安全問題，特別是國外的食品安全事件大多是由微生物致病菌導(dǎo)致，而我國因很多菜品需要高溫加工，大大降低了致病微生物的污染幾率。但是，據(jù)國家衛(wèi)生與健康委員會統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，近10年來食源性致病微生物仍然是引起食源性中毒的主要原因，同時也是我國食品安全的核心問題。目前，中國計(jì)量科學(xué)院以將微生物精準(zhǔn)測量方法應(yīng)用于食品微生物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備工藝中，獲批了14種食品微生物國家有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（見表2），現(xiàn)已為國內(nèi)食品檢測機(jī)構(gòu)的質(zhì)量控制提供了計(jì)量支撐。從2019年以來，中國計(jì)量科學(xué)研究院基于微生物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備技術(shù)承擔(dān)了國家市場監(jiān)管總局本級承檢機(jī)構(gòu)盲樣考核任務(wù)，現(xiàn)已開展了奶粉中菌落總數(shù)、奶粉中金黃色葡萄球菌、米粉中大腸菌群和蛋粉中沙門氏菌等10多項(xiàng)能力驗(yàn)證項(xiàng)目，并為北京、山東、黑龍江和江蘇等省級檢測機(jī)構(gòu)提供了上千單元的微生物能力驗(yàn)證樣品。通過組織微生物盲樣考核和能力驗(yàn)證，中國計(jì)量科學(xué)研究院幫助食品檢測機(jī)構(gòu)查找微生物檢測的影響因素，穩(wěn)步提升了我國食品微生物檢測能力和水平。
此外，按照目前國際通用標(biāo)準(zhǔn)，食品中的金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、大腸桿菌O157:H7等致病微生物限量檢出或不得檢出，依據(jù)現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)微生物的檢測需要很長時間。以沙門氏菌為例，傳統(tǒng)沙門氏菌檢測方法是通過多次培養(yǎng)、形態(tài)學(xué)鑒定、生化鑒定和血清學(xué)鑒定等多達(dá)近9個步驟，耗時近4天以上，因此其檢測效率低，時效性差。為提升食品微生物檢測效率和縮短檢測時間，中國計(jì)量科學(xué)研究院基于免疫熒光流式分析技術(shù)和微生物富集技術(shù)研究建立了食品基質(zhì)中痕量微生物活菌快速靈敏測量方法，將現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中數(shù)天的檢測時間縮短到8小時以內(nèi)，實(shí)現(xiàn)了一個工作日即可完成痕量微生物的檢測。
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過梳理已有文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，巴戟天含有糖類、環(huán)烯醚萜類、氨基酸類、蒽醌類、微量元素等多種化學(xué)成分；巴戟天提取物及其有效成分具有多種藥理活性，如抗抑郁、抗癡呆、抗衰老、抗炎、促進(jìn)血管生成等作用，并且不同成分、不同溶劑提取物的藥理活性不同。然而，現(xiàn)有研究也存在一些問題：①在化學(xué)成分方面，只是機(jī)械地進(jìn)行了藥物成分的廣泛篩選，應(yīng)根據(jù)巴戟天的藥理作用，進(jìn)行有針對性的研究；②在研究藥理作用方面，實(shí)驗(yàn)選取的造模方法和觀察的指標(biāo)均較為單一，很多實(shí)驗(yàn)屬于重復(fù)性研究；③在藥理研究方面，現(xiàn)有研究大多側(cè)重觀察和評估藥物的療效。
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野花椒具有廣泛的藥理作用，包括抗炎、抗菌、殺蟲、抗腫瘤、心腦保護(hù)、抑制血小板聚集等。另有研究表明該化合物能通過促進(jìn)RCT、CEBPαS21/LXRα和TLR4/NF-κB途徑來減少炎癥反應(yīng)進(jìn)而抑制動脈粥樣硬化，還可能通過抑制NF-κB信號傳導(dǎo)從而對化學(xué)誘導(dǎo)的炎癥性腸病產(chǎn)生抗炎作用。Su等發(fā)現(xiàn)異嗪皮啶能通過抑制炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子減輕由IL-1β引誘的人髓核細(xì)胞炎癥，能在椎間盤退變中起到預(yù)防作用。另有研究發(fā)現(xiàn)異嗪皮啶能通過抑制NLRP3炎性體降低MI患者全身和局部的炎癥反應(yīng)。
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數(shù)字PCR是近年來迅速發(fā)展的一種核酸分子定量檢測技術(shù)，與傳統(tǒng)檢測方法相比具有不依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線、靈敏度和精準(zhǔn)度高等優(yōu)勢，在食品轉(zhuǎn)基因成分分析、動植物產(chǎn)品檢測、微生物檢測等相關(guān)領(lǐng)域逐漸顯現(xiàn)出巨大的應(yīng)用價值和發(fā)展前景。本文對數(shù)字PCR的原理、應(yīng)用、存在的問題及發(fā)展趨勢等進(jìn)行綜述及分析，為數(shù)字PCR在食品檢測中的應(yīng)用提供參考。
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過崗龍為豆科Leguminosae榼藤子屬植物榼藤子Entada phaseoloides(Linn.)Merr．的干燥藤莖，又名過江龍、過山楓、大血藤、扭骨風(fēng)、過崗扁龍、脊龍等，分布于福建、臺灣、廣東、廣西、云南等省區(qū)。過崗龍性涼，味澀、微苦，歸肝、脾經(jīng)，有小毒，具祛風(fēng)除濕、活血通絡(luò)之功效，臨床上用于治療風(fēng)濕痹痛、腰腿疼痛、跌打腫痛等疾病。瑤醫(yī)還用于治療偏癱、痔瘡出血、蛇蟲咬傷等。
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榼藤子植物的種子和藤莖均可做藥用，其臨床功效有所差別，榼藤子種子具有補(bǔ)氣補(bǔ)血、健胃消食、除風(fēng)止痛、強(qiáng)筋硬骨之功效，其藤莖(過崗龍)主要具有祛風(fēng)除濕、活血通絡(luò)的功效。目前，國內(nèi)外對榼藤子種子研究較多，對藤莖的研究相對較少。而過崗龍資源豐富，化學(xué)成分多樣，且臨床應(yīng)用廣泛的過崗龍片具有良好的治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的作用。因此，對過崗龍進(jìn)一步的化學(xué)成分和藥理作用研究，明確其發(fā)揮療效的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制，并完善其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)具有重要意義。
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